人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA KIT的主要应用

背景^[1-3]

人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定标本中人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)水平。用纯化的人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入视黄醇结合蛋白4(RBP-4)，再与HRP标记的视黄醇结合蛋白4(RBP-4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的视黄醇结合蛋白4(RBP-4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)浓度。

计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。视黄醇结合蛋白(Retinol-Binding Protein,RBP)是血液中维生素的转运蛋白，由肝脏合成、广泛分布于血液、脑脊液、尿液及其他体液中。测定视黄醇结合蛋白能早期发现肾小管的功能损害，并能灵敏反映肾近曲小管的损害程度，可作为肾功能早期损害和监护治疗的指标，还可作为肝功能早期损害和监护治疗的指标。

应用^[4][5]

人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA KIT用于视黄醇结合蛋白4与代谢综合征的相关性研究。

脂肪因子视黄醇结合蛋白4(Retinol-binding protein-4,RBP4)与代谢综合征的关系,探讨它对胰岛素抵抗、肥胖以及糖、脂代谢等方面的作用,对代谢综合征的并发症如冠心病、糖尿病等疾病的影响,以及他汀类药物对RBP4表达水平的调控作用。方法：ELISA试剂盒测定血清RBP4在单纯冠心病和冠心病合并2型糖尿病患者中的变化,观察RBP4与体脂、糖、脂代谢及肝功能的关系。建立代谢综合征大鼠模型,ELISA法比较两组血清RBP4水平、IL-6和MDA,Western-blot方法观察肝脏、附睾脂肪和心肌组织中RBP4的含量变化,RT-PCR方法检测RBP4、脂联素和PPAR-y mRNA在各个组织的表达变化。体外诱导3T3-L1小鼠前脂肪细胞为脂肪细胞后,Western-blot方法观察不同浓度和不同时间他汀类药物辛伐他汀对细胞RBP4表达水平的调控作用,RT-PCR方法检查不同组的辛伐他汀对于RBP4、脂联素和PPAR-γmRNA的表达变化。

结果：冠心病合并2型糖尿病患者血清RBP4升高显著,单纯冠心病患者血清RBP4无明显升高,腰围、TG和年龄是RBP4的独立相关因素。代谢综合征大鼠的肝脏、附睾脂肪和心肌组织RBP4含量均升高显著,血清RBP4、IL-6和MDA升高显著,RBP4mRNA在肝脏、脂肪和心脏组织中均升高,脂联素mRNA下降,PPAR-γmRNA升高。辛伐他汀可以显著降低3T3-L1诱导的成熟脂肪细胞分泌RBP4。结论：RBP4与冠心病可能无显著相关,与冠心病合并2型糖尿病相关,与血糖、血脂、血压以及胰岛素抵抗有关指标有着不同程度的相关,提示RBP4可能是提示代谢综合征的一项血清学标志物。代谢综合征中RBP4与脂联素表达相反。

参考文献

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[2]Association of serum levels of retinol-binding protein 4 with male sex but not with insulin resistance in obese patients[J].FatmaÜ,lgen,Christian Herder,Markus C.Kü,hn,Holger S.Willenberg,Matthias Schott,Werner A.Scherbaum,Sven Schinner.Archives of Physiology and Biochemistry.2010(2)

[3]Retinol binding protein 4:An adipokine associated with intra-amniotic infection/inflammation[J].Edi Vaisbuch,Shali Mazaki-Tovi,Juan Pedro Kusanovic,Offer Erez,Nandor Gabor Than,Sun Kwon Kim,Zhong Dong,Francesca Gotsch,Pooja Mittal,Tinnakorn Chaiworapongsa,Percy Pacora,Lami Yeo,Sonia S.Hassan,Roberto Romero.Journal of Maternal-Fetal and Neonatal Medicine.2010(2)

[4]Liposomal Simvastatin Attenuates Neointimal Hyperplasia in Rats[J].Eyal Afergan,Meital Ben David,Hila Epstein,Nickolay Koroukhov,Dalia Gilhar,Keren Rohekar,Haim D.Danenberg,Gershon Golomb.The AAPS Journal.2010(2)

[5]王湘芸.视黄醇结合蛋白4与代谢综合征的相关性研究[D].第二军医大学,2010.