DNA酶1样蛋白1抗体的应用

背景^[1-3]

DNA酶1样蛋白1抗体是一类可以特异性结合DNA酶1样蛋白1的多克隆抗体，主要用于Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中DNA酶1样蛋白1水平。用纯化的DNA酶1样蛋白1抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入DNA酶1样蛋白1，再与HRP标记的DNA酶1样蛋白1抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的DNA酶1样蛋白1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中DNA酶1样蛋白1浓度。

脱氧核糖核酸酶Ⅰ是一种核酸内切酶，最早由M．Kunitz结晶的所得。离子的存在对切断方式有着明显的影响。在不断的研究发展过程中，也被作为一种研究材料。

脱氧核糖核酸酶Ⅰ是最有代表性的核酸内切酶。最早是由M．Kunitz从胰脏中分离出结晶的，也称为胰脱氧核糖核酸酶或DNaseⅠ，EC3．1．21．1。分子量约3.1万，等电点pH4.7，最适PH 7附近，需要Mg2和Mn2。分离单链和双链DNA，产生具有5′-磷酸末端的分解物。

在一般条件下其分解产物含有1到8—12个寡聚核苷酸，平均大小等于四个核苷酸。反应初期似乎是先分解dpPupPy键，但因二价离子的存在对切断的方式有显著影响。因此酶容易得到结晶，所以于核酸的研究上广泛应用；又由于对整个结构已经明确，因而也是酶化学研究的材料。

应用^[4][5]

用于聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1在低剪切力诱导的动脉粥样硬化中的作用及机制研究

动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性疾病,最先发生于血流动力学紊乱的血管分叉或狭窄的部位。

局部血流变化与这种部位特异性密切相关,其中一个重要的因素是剪切力(WSS)。剪切力是血液在血管中流动时对血管内膜产生的一种摩擦力。剪切力的大小与血液流速成正比,比管腔半径成反比。生理剪切力的大小介于0.5-1.2Pa,小于0.5Pa或者大于1.2Pa分别称为低剪切力和高剪切力。剪切力作用于内皮细胞能引起胞内各种信号转导分子的激活,如蛋白激酶C(PKC)、丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)等。

此外,低剪切力能够促进促动脉硬化物质在管腔和管壁之间的转运,因此能促进动脉粥样硬化的发生。聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP-1)是一种高度保守的DNA结合蛋白。作为一种核酶,PARP-1参与了DNA损伤后的修复。

一旦与损伤的DNA结合,PARP-1会被激活并催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)裂解为尼克酰胺和ADP核糖,从而在DNA修复、基因转录、细胞周期、细胞死亡、染色体功能和遗传稳定性中发挥重要的作用。然而,PARP-1过度活化会引起细胞内NAD+和ATP的耗竭,导致细胞能量危机、细胞毒性和细胞死亡。

参考文献

[1]Deficiency of Rac1 Blocks NADPH Oxidase Activation,Inhibits Endoplasmic Reticulum Stress,and Reduces Myocardial Remodeling in a Mouse Model of Type 1 Diabetes[J].Li,Jianmin,Zhu,Huaqing,Shen,E,Wan,Li,Arnold,J Malcolm O,Peng,Tianqing.Diabetes.2010(8)

[2]Modulation of myocardial metabolism:an emerging therapeutic principle[J].John D Horowitz,Yuliy Y Chirkov,Jennifer A Kennedy,Aaron L Sverdlov.Current Opinion in Cardiology.2010(4)

[3]Diabetic cardiomyopathy:mechanisms and therapeutic targets[J].Pavan K Battiprolu,Thomas G Gillette,Zhao V Wang,Sergio Lavandero,Joseph A Hill.Drug Discovery Today:Disease Mechanisms.2010(2)

[4]Regulation of the expression of inducible nitric oxide synthase[J].Andrea Pautz,Julia Art,Susanne Hahn,Sebastian Nowag,Cornelia Voss,Hartmut Kleinert.Nitric Oxide.2010(2)

[5]秦伟栋.聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1在低剪切力诱导的动脉粥样硬化中的作用及机制研究[D].山东大学,2013.