A型流感病毒-NS1抗体(神经氨酸酶1)的应用

背景[1-3]

A型流感病毒-NS1抗体(神经氨酸酶1)是可以特异性结合A型流感病毒-NS1(神经氨酸酶1)的一类多克隆抗体。抗体的主要功能是与抗原（包括外来的和自身的）相结合，从而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物，抗体（antibody）是一种应答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。每种抗体与特定的抗原决定基结合。这种结合可以使抗原失活，也可能无效但有时也会对机体造成病理性损害，如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生，对人体可造成危害。

抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。 当机体受到抗原刺激后,产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此,由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物,称为多克隆抗体。由于具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点，被广泛应用于免疫学诊断领域。

应用[4][5]

用于不同亚型流感病毒NS1与PSD-95相互作用及对神经元NO的影响研究

A型流感病毒Non-structrual protein 1(NS1)能与宿主细胞内众多蛋白相互作用,表现为对宿主的免疫抑制作用,并影响信号转导和蛋白质合成。NS1蛋白含有约230个氨基酸片段,C-末端4个氨基酸被称为PDZ结合基序(PDZ binding motif)。突触后密度蛋白(Postsynaptic Density Proteins,PSD-95)主要存在于神经元细胞,含有3个PDZ结构区域(PDZ domain)。PSD-95作为神经元细胞鹰架蛋白,结合了众多功能蛋白。PSD-95在神经元细胞离子平衡,信号转导,N-甲基-D-门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)聚集等方面均发挥着重要作用。

为了研究A型流感病毒NS1与PSD-95蛋白之间存在的相互作用及不同亚型流感病毒NS1与PSD-95相互作用的差异;检测这两种蛋白结合作用对神经元细胞功能的影响。利用基因克隆技术,通过GST-pull down,酵母双杂交,免疫共沉淀,免疫荧光定位等技术来确定不同亚型流感病毒NS1蛋白与神经元突触后密度蛋白PSD-95之间的相互作用。通过测定nitric oxide(NO)含量变化来证实NS1与PSD-95相互结合后对神经元细胞功能的影响。

参考文献

[1]Structure of an avian influenza A virus NS1 protein effector domain[J].Benjamin G.Hale,Wendy S.Barclay,Richard E.Randall,Rupert J.Russell.Virology.2008(1)

[2]Dual infections by influenza A/H3N2 and B viruses and by influenza A/H3N2 and A/H1N1 viruses during winter 2007,Corsica Island,France[J].A.Falchi,C.Arena,L.Andreoletti,J.Jacques,N.Leveque,T.Blanchon,B.Lina,C.Turbelin,Y.Dorléans,A.Flahault,J.P.Amoros,G.Spadoni,F.Agostini,L.Varesi.Journal of Clinical Virology.2007(2)

[3]Severe influenza resembling hemorrhagic shock and encephalopathy syndrome[J].J.Gooskens,T.Kuiken,E.C.Claas,H.I.Harinck,J.C.Thijssen,H.J.Baelde,A.C.Kroes.Journal of Clinical Virology.2007(2)

[4]A site on the influenza A virus NS1 protein mediates both inhibition of PKR activation and temporal regulation of viral RNA synthesis[J].Ji-Young Min,Shoudong Li,Ganes C.Sen,Robert M.Krug.Virology.2007(1)

[5]张衡.不同亚型流感病毒NS1与PSD-95相互作用及对神经元NO的影响[D].汕头大学,2011.