宽缨酮的制备

背景及概述^[1][2]

无患子苦木科(Simarubaceae)植物东革阿里(Eurycoma longifolia Jack)，英文名：Ali′s Umbrella，别名：阿里之杖、东革亚里、马来参、天然的催情药、大地武士、森林之王、治百病的药等。是生长在东南亚靠近赤道的原始热带雨林中潮湿砂质土壤里的一种野生灌木植物，东革阿里的根部有多种功效，与燕窝、锡器一起并称为马来西亚三大国宝。

东革阿里提取物主要化学成分为：宽缨酮(eurycomanone)、抗氧化酶、(eurycomanol)、生物碱(eurycomalactone)、各种β-咔啉类(canthine-6-one alkaloids)物质、枯木苦味素等。宽缨酮的分子式：C20H24O9，分子量408.4，密度：1.63g/cm3，沸点：669.5℃，闪点：239.9℃，折射率：1.684，属于甾酮。东革阿里中苦木素类化合物是其主要活性成分，宽缨酮(eurycomanone，EN)是其中最具代表性的。目前在保健品、药品中的应用均为低含量或比例产品，未来为了达到更好的效果，需要更高含量的宽缨酮。

宽缨酮

应用^[3]

1)抗抑郁、抗疲劳、增进体能、保持旺盛精力。2)加强人体血液循环及新陈代谢、降低心脏病、心肌梗塞风险。3)提高自身免疫能力、抗病毒、抗疟疾、可作为抗癌和抗艾滋病的辅助治疗。4)缓解糖尿病、高血压、痛风及风湿病等代谢类疾病症状。5)促进人体自身分泌睾酮，促进人体肌肉增长。6)改善性冷淡、提高中老年人性能力、延长性事时间、增加性事次数和快感、性事后快速恢复体力。7)修复和滋补人体性腺、生殖系统、对消除前列腺炎症状效果显著。8)提升男性精子产量、增进精子活跃度从而提高生育能力。9)抗氧化、抗衰老、改善认知能力、降低患老年痴呆症的风险。10)延缓更年期、产后滋补、加快子宫收缩。11)调节内分泌系统、抗溃疡、抗过敏反应、退热、止痛、肺结核、黄疸等。

制备^[2]

方法一：

在6Ton的多功能提取罐中加入0.6Ton东革阿里树根粗粉，以4.8Ton，4.2Ton，3.6Ton乙醇，在回流状态下分别提取1.5，1.0，0.5h，提取液在-0.08Mpa下浓缩至比重1.15，得到东革阿里提取物浸膏。加入3倍量(w/w)的石油醚(60～90℃)萃取3次，静置，分层，弃去石油醚液，保留下层液。将脱脂后的液体以5倍量(w/w)的乙酸乙酯萃取3次，静置，分层，弃去水液，保留乙酸乙酯液。

将乙酸乙酯液浓缩后拌入硅胶，晾干，研细，加入硅胶柱顶使其表面距柱口30～50cm，先以氯仿洗脱，薄层色谱检测，直至杂质洗脱干净，再分别以氯仿∶乙酸乙酯＝100∶10，100∶20，100∶30洗脱，薄层色谱检测，收集含有宽缨酮成分的洗脱液，加入5％(w/v)的活性炭，在回流状态下保温脱色30min，过滤，减压浓缩，25℃下结晶24～72h，过滤，得到粗品宽缨酮。在粗品宽缨酮中加入8倍量(w/w)石油醚(60～90℃)，缓缓滴加乙酸乙酯，缓缓搅拌，直至粗品宽缨酮表面的色素杂质洗涤干净，立即过滤，得到白色精品宽缨酮，保持真空度-0.08Mpa，温度40～60℃下干燥2.5h，得到精品宽缨酮晶体，含量98.6％(HPLC)。

方法二：

（1）加酶浸泡：将5kg东革阿里粉碎至10～30目后，浸泡于12.5L水中，然后加入1.25g纤维素酶制剂，在40℃下，酶解120min，得酶解东革阿里；

（2）加热浸提：在步骤（1）所得酶解东革阿里中加入40kg水，在85℃下，连续逆流浸提90min，得40.35kg东革阿里浸提液；

（3）离心脱脂：将40.35kg步骤（2）所得东革阿里浸提液冷却至9℃后，先以3000r/min的速率进行卧螺离心，再以10000r/min的速率进行管式离心，得39.50kg脱脂液；

（4）超滤、纳滤：将39.50kg步骤（3）所得脱脂液用截留分子量为5万Da的超滤膜，在操作压力1.5MPa，物料温度为30℃的条件下，进行超滤，超滤液再用截留分子量为6000Da的纳滤膜，在操作压力为2.0MPa，物料温度为30℃的条件下，纳滤至滤出液电导率为300μs/cm为止，得宽缨酮纳滤截留液950mL；

（5）树脂层析：将950mL步骤（4）所得宽缨酮纳滤截留液上50mL的HP20型大孔树脂，然后先用乙醇/纯水体积比为10:90的溶液洗脱2BV，洗脱完后层析柱流出液无色且澄清透亮，洗脱液作废液处理，然后再用乙醇/纯水体积比为80:20的溶液洗脱2BV，收集该段所有洗脱液，将该段洗脱液在真空度-0.08MPa，65℃下，真空浓缩，得4.60g浓缩液；

（6）醇相结晶、干燥：在步骤（5）所得4.60g浓缩液中加入1.0mL无水乙醇充分搅拌，严密过滤，然后置于2℃下，冷却结晶24h，得6mL晶体，然后将晶体用2℃的冰水洗涤2次，每次用水10mL，重复冷却结晶1次并洗涤，真空干燥，得1.50g宽缨酮产品。

所得宽缨酮产品呈白色粉末状，经高效液相色谱法检测（色谱图如图1所示），宽缨酮的出峰时间为9.35min，宽缨酮的纯度为98.1%，最终收率为94.93%。

主要参考资料

[1] 李红亮, 于秀颖, 马崇鸣, Kiew Lik-Voon, Mohammad Rais Mustafa, & 李卫国等. (2016). 东革阿里中活性成分宽缨酮的提取及纯化工艺研究. 中国药学杂志, 051(014), 1169-1175.

[2] 刘寒毅. (2017). 一种从东革阿里中快速高效提取宽缨酮的工艺 A rapid and efficient extraction process from one wide Ying tongkat ali in.

[3] 杨美莲, 樊志峰, 罗燕萍, 曹建新, & 程桂广. (2016). 东革阿里树皮的化学成分研究. 云南民族大学学报:自然科学版(25), 490.