异鸟苷的制备

发布日期:2020/6/19 11:33:32

背景及概述^[1][2]

巴豆，（学名：Crotontiglium）为大戟科巴豆属植物巴豆树的干燥成熟果实，其根及叶亦供药用。巴豆树为常绿乔木，高6~10米。中医药上以果实中的异鸟苷入药，性热，味辛，功能破积、逐水、涌吐痰涎，有助于治寒结便秘、腹水肿胀、寒邪食积所致的胸腹胀满急痛、大便不通、泄泻痢疾、水肿腹大、痰饮喘满、喉风喉痹、痈疽、恶疮疥癣，有小毒，须慎用。异鸟苷产于浙江南部、福建、江西、湖南、广东、海南、广西、贵州、四川和云南等省区。

异鸟苷又名巴豆苷，2-羟基腺苷，异鸟苷是一种以生物碱为苷元的核糖苷，目前异鸟苷主要采用水提，但提取率不高，杂质多、纯度低且易变质等，不利于进一步开展相关药学、药效、活性机制研究。近年来，大量研究表明巴豆中异鸟苷具有限制的抗肿瘤作用，如能诱导人肝癌SMMC-7721细胞、人胃腺癌GC-7901细胞等肿瘤凋亡。

异鸟苷

应用^[3]

目前，已有报道异鸟苷具有抑制S-180腹水癌细胞和埃利希氏瘤细胞的生长的作用(KimJHetal.，IsolationofisoguanosinefromCrotontigliumanditsanti-tumoractivity，ArchPharmRes，1994，17(2))，异鸟苷对白血病细胞有非常强的抑制作用，而且在体内抑制白血病的作用良好，可以在副作用很小的情况下起到抑制的作用，临床应用前景良好。

制备^[2]

目前国内外异鸟苷的提取、纯化方法主要有：回流提取法、超临界流体萃取法、聚酰胺柱层析法等。这些方法均存在诸多不足：回流提取法，具有耗时长、有效成分提取率低、操作复杂的缺点；超临界流体萃取法虽然具有无溶剂残留、提取率高、环保等优点，但其提取条件苛刻，设备昂贵，维修困难，不适合工业化生产；而聚酰胺纯化法对异鸟苷类成分的不可逆吸附值高，其所得产品纯度低，且洗脱麻烦。

具体方法：

方法一：

将巴豆于60℃烘干，粉碎，过40目筛；将处理后的巴豆粉加入其质量1倍的蒸馏水，再加入其原料质量2%的复合酶液（纤维素酶：半纤维素酶=3:1），调节pH至4，在55℃恒温酶解2h；将所得物料置于超声装置中，再次加入原料重量4倍的70%的乙醇溶液，于超声频率40KHz、温度60℃的条件下提取3h，提取液减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；将所得浓缩液经大孔吸附树脂D-101上柱70%的乙醇洗脱，树脂用量与原料的质量比为1:2，收集洗脱液，浓缩、干燥即得异鸟苷。

方法二

将巴豆粉碎，过20目筛；加入5倍的60%的乙醇溶液，置于频率为40KHz的超声装置中，于超声功率500W、超声温度65℃的条件下提取3h，过滤，滤液减压浓缩，浓缩液上硅胶柱，体积比为50:3的氯仿-甲醇洗脱，洗脱剂流速为2.0mL/min，TLC跟踪监测，收集洗脱液，浓缩后经高速逆流色谱法溶剂系统为环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水、体积比为5:4:7:3、上相为固定相、下相为流动相分离纯化，冷冻干燥得异鸟苷产品，经检测，纯度为98.4%。