beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐的有关物质检测

背景及概述^[1]

beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐通常都是由β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP水解成盐而得到。NADP是一种辅酶，是β-烟酸酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD与一个磷酸分子以酯键结合的物质，广泛存在生物体内能量代谢过程，嘌呤核苷酸是机体重要的能量物质。β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP是细胞能量代谢所必需的辅酶，在能量代谢中起着核心作用。此外，嘌呤核苷酸在生物过程中也起着重要的传递作用，能量反应中的质子通常先被传递至NAD和NADP，再还原成NADH和NADPH，经过电子传递至氧并释放能量。而生成的还原性NADH和NADPH是谷胱甘肽还原酶的辅酶，具有重要的抗氧化功能。

检测^[1]

一种β-NADP二钠盐含量及有关物质的测定方法，所述有关物质为NAD、ATP、ADP，其特征在于包括以下步骤：

A、取sigma对照品:beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐用稀释剂溶解成浓度为1mg/ml的对照品溶液；取beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐样品用稀释剂溶解成浓度为0.5mg/ml的供试品溶液；

B、分别取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪中，记录色谱图中beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐的峰面积，按照外标法，以无水beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐来计算HPLC含量，不小于98％；

C、分别取sigma对照品NAD、ATP、ADP用流动相分别溶解成浓度为5ug/ml、2.5ug/ml、2.5ug/ml的杂质对照品溶液，取beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐样品用流动相溶解成浓度为0.5mg/ml的样品溶液；

D、分别取NAD、ATP、ADP的杂质对照品溶液各20ul，注入液相色谱仪中，记录色谱图中NAD、ATP、ADP的峰面积，再按照外标法计算beta-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐样品中NAD、ADP、ATP的含量，其中NAD、ADP、ATP分别各不超过1.0％、0.5％、0.5％。

参考文献

[1] CN201610192347.X 一种β-NADP二钠盐含量及有关物质的测定方法