DEPDC1 细胞周期调控蛋白SDP35抗体的应用

背景^[1-3]

DEPDC1细胞周期调控蛋白SDP35抗体是一类可以特异性结合DEPDC1细胞周期调控蛋白SDP35的多克隆抗体，主要用于检测DEPDC1细胞周期调控蛋白SDP35的免疫组化、ELISA等实验。DEPDC1是一种784个氨基酸的核蛋白，在睾丸中表达并在膀胱癌细胞中上调。DEPDC1包含DEP域和Rho-GAP域，可能在膀胱癌细胞的生长中起重要作用，并被认为是膀胱癌治疗的新型蛋白质靶标。

DEPDC1是由其他剪接事件产生的五种同工型，由位于人类1号染色体上的一个基因编码，该基因跨越2.6亿个碱基对，包含3,000多个基因，占人类基因组的近8％。1号染色体上有许多与疾病相关的基因，包括那些与家族性腺瘤性息肉病，Stickler综合征，帕金森氏病，Gaucher病，精神分裂症和Usher综合征有关的基因。

1号染色体的畸变存在于多种癌症中，包括头颈癌，DEPDC1细胞周期调控蛋白SDP35作为转录共抑制因子参与转录调控。DEPDC1A-ZNF224复合物可能通过抑制A20基因的转录，从而导致NF-KB蛋白转运到细胞核中，从而抑制膀胱癌细胞的凋亡，从而在膀胱癌的发生中起关键作用。

DEPDC1基因是新发现的肿瘤相关基因，位于染色体1p31.2，全长约23Kb，编码分子量为93kd和61kd大小的两种蛋白质。已有研究表明DEPDC1在膀胱癌、乳腺癌、肺腺癌等恶性肿瘤中呈现过表达，而在除睾丸以外的其他24种正常组织(如肺、卵巢、肾等)中未发现阳性表达。

应用^[4][5]

用于DEPDC1基因在鼻咽癌中作用的初步研究

对DEPDC1基因在鼻咽癌中的作用进行初步探讨和分析，为鼻咽癌的临床治疗提供实验基础和理论依据。

方法：（1）沉默DEPDC1基因对鼻咽癌细胞系HNE-1、CNE-1生长、凋亡、周期的影响：根据siRNA靶序列设计原则和方法，设计针对DEPDC1基因的siRNA序列，并转染入HNE-1、CNE-1细胞，分别在mRNA和蛋白质水平检测DEPDC1基因表达量。通过倒置显微镜观察细胞形态变化，流式细胞术检测两种细胞的凋亡和周期变化。采用MTS、平板克隆实验检测细胞的生长增殖情况。

（2）DEPDC1基因表达下调对细胞系HNE-1生长、凋亡、周期影响的机制研究：采用荧光定量PCR检测HNE-1细胞中NF-κB通路的相关细胞因子的变化情况。同时采用荧光定量PCR和蛋白印迹检测HNE-1中细胞分子CCNB1的变化。

结果：（1）通过PCR及Western Blot检测显示设计合成的siRNA可有效抑制DEPDC1基因的表达。细胞系HNE-1、CNE-1均出现明显的细胞形态改变，细胞生长增殖受抑，细胞凋亡明显增加，细胞周期阻滞于G2/M期。

（2）荧光定量PCR检测HNE-1细胞，结果显示NF-κB通路中多个肿瘤相关细胞因子出现变化。即抑制NF-κB激活的A20基因表达量明显上调，受NF-κB调控的肿瘤相关靶基因的表达量下降，包括C-MYC、BCL-2、MMP9、ICAM-1基因。与细胞周期密切相关的CCNB1分子的表达在mRNA水平无明显变化。在蛋白水平，其表达量上升。

参考文献

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[2]SUZ12 is involved in progression of non-small cell lung cancer by promoting cell proliferation and metastasis[J].Chunhua Liu,Xuefei Shi,Li Wang,Ying Wu,Feiyan Jin,Cuiqing Bai,Yong Song.Tumor Biology.2014(6)

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[4]Cancer Peptide Vaccine Therapy Developed from Oncoantigens Identified through Genome-wide Expression Profile Analysis for Bladder Cancer[J].Wataru Obara,Ryuji Ohsawa,Mitsugu Kanehira,Ryo Takata,Takuya Tsunoda,Koji Yoshida,Kazuyoshi Takeda,Toyomasa Katagiri,Yusuke Nakamura,Tomoaki Fujioka.Japanese Journal of Clinical Oncology.2012(7)

[5]何龙霞.DEPDC1基因在鼻咽癌中作用的初步研究[D].重庆医科大学,2014.