B细胞活化因子受体抗体的应用

背景^[1-3]

B细胞活化因子受体抗体是一类可以特异性结合B细胞活化因子受体蛋白的多克隆抗体，主要用于检测B细胞活化因子受体蛋白的免疫组化、ELISA等实验。B细胞活化因子受体包括BAFF-R、BCMA(B细胞成熟抗原)和TACI三种。BAFF-R为特异性受体，是介导外周B细胞发育的最主要受体；BCMA和TACI则是与APRIL共有的受体。

B细胞活化因子（BAFF）是TNF配体超家族成员，由巨噬细胞，树突细胞和T淋巴细胞产生。BAFF促进B细胞的存活，对B细胞成熟至关重要。BAFF与三种TNF受体超家族成员结合：B细胞成熟抗原（BCMA/TNFRSF17），跨膜激活剂和钙调节剂和亲环蛋白配体相互作用物（TACI/TNFRSF13B）和BAFF受体（BAFF R/BR3/TNFRSF 13C）。这些受体是缺乏信号肽的III型跨膜蛋白。尽管TACI和BCMA结合BAFF和另一种TNF超家族配体APRIL（增殖诱导配体），但BAFF R选择性结合BAFF。

BAFF R细胞外结构域缺乏TNF受体经典的富含半胱氨酸的结构域（CRD）并且仅含有具有四个α半胱氨酸残基的部分CRD。人和小鼠BAFF R具有56%的同一性。BAFF R在脾，淋巴结和静息B细胞中高度表达。它还在活化的B细胞，静息CD4+T细胞，胸腺和外周血白细胞中以较低水平表达。B细胞活化因子属肿瘤坏死因子超家族成员(TNFSF13B)，主要由单核细胞、树突状细胞及T细胞产生，可促进B细胞成熟和分化，在免疫应答中起重要作用，并与自身免疫密切相关。膜型BAFF主要表达于抗原提呈细胞，蛋白酶可使之水解而转变为可溶性BAFF。

应用^[4][5]

用于白喉毒素/人B细胞活化因子融合蛋白对人急性白血病BALL-1细胞杀伤作用实验性研究

免疫毒素的毒性部分主要来源有一下几类：植物来源的毒素，细菌来源的毒素，人源性蛋白毒素以及其中的来源的毒素等。区和酶活性区，C片段是其酶活性区，主要活性作用是失活核蛋白体上的肽链EF-2，从而抑制细胞合成蛋白质，导致细胞变性坏死，应用这个优势特性发挥杀伤肿瘤细胞目的研究免疫毒素DT388sBAFF的探讨。它的作用。本研究通过以白喉毒素为毒性部分，而通过免疫毒素DT388sBAFF来探讨其是否对人急性白血病BALL-1细胞存在抑制作用，从而为急性白血病提供新的研究方向。

1利用实时荧光定量PCR技术检测人急性白血病BALL-1细胞上BAFF三种受体

2.利用FITC荧光素标记技术检测重组免疫毒素DT388sBAFF与人急性白血病BALL-1细胞结合能力。

3细胞毒性实验检测重组免疫毒素DT388sBAFF对人急性白血病BALL-1细胞的杀伤作用。

4利用SPSS18.0统计软件中的方差分析功能对结果进行统计分析。

结果1BAFF的每种受体（BAFF-R，TACI和BCMA）中，只有BAFF-R在人急性白血病BALL-1细胞上高表达（P<0.05），TACI和BCMA基本不表达（P>0.05）。

2FITC荧光素标记的重组免疫毒素DT388sBAFF后在倒置荧光显微镜下可观察到人急性白血病BALL-1细胞有反向绿色荧光的出现，而又不会重复U937细胞则未见荧光，而阳性对照Hmy2.CIR细胞亦出现荧光绿色荧光，而且急性白血病BALL-1细胞和阳性对照Hmy2.CIR细胞只同时表达BAFF一种受体：BAFF-R，这表明重组免疫毒素DT388sBAFF与上述细胞表面受体BAFF-R具有特异性结合能力。

参考文献

[1]Cell-Targeting Fusion Constructs Containing Recombinant Gelonin[J].Mi-Ae Lyu,Yu(Joshua)Cao,Khalid A.Mohamedali,Michael G.Rosenblum.Methods in Enzymology.2012

[2]BAFF and selection of autoreactive B cells[J].Zheng Liu,Anne Davidson.Trends in Immunology.2011(8)

[3]Genetic Tumor Profiling and Genetically Targeted Cancer Therapy[J].Cathleen M.Goetsch.Seminars in Oncology Nursing.2011(1)

[4]Recombinant immunotoxins and other therapies for relapsed/refractory hairy cell leukemia[J].Robert J.Kreitman,Evgeny Arons,Maryalice Stetler-Stevenson,David J.P.Fitzgerald,Wyndham H.Wilson,Ira Pastan.Leukemia&Lymphoma.2011(S2)

[5]高新谱.白喉毒素/人B细胞活化因子融合蛋白对人急性白血病BALL-1细胞杀伤作用实验性研究[D].山东大学,2012.