B细胞淋巴瘤蛋白3抗体的应用

背景^[1-3]

B细胞淋巴瘤蛋白3抗体是一类可以特异性结合B细胞淋巴瘤蛋白3的多克隆抗体，主要用于检测B细胞淋巴瘤蛋白3的免疫组化、ELISA等实验。B细胞淋巴瘤是B细胞发生的实体肿瘤。包括霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤。其分型众多，经典霍奇金淋巴瘤和结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤，现在被认为是起源于B细胞的肿瘤。

弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤（MALT）、小淋巴细胞淋巴瘤/慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤（MCL）5种B细胞非霍奇金淋巴瘤最为常见，占非霍奇金淋巴瘤的3/4。B细胞淋巴瘤的预后和治疗取决于淋巴瘤的具体类型以及分期分级。

B细胞淋巴瘤蛋白3有助于调节NF-κB靶基因的转录激活。在细胞质中，抑制NF-κBp50亚基的核易位。在细胞核中，充当促进NF-κB靶基因转录的转录激活因子有助于调节细胞增殖。核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）蛋白最早由David Baltimore发现，该蛋白家族可以选择性的结合在B细胞κ-轻链增强子上调控许多基因的表达。

在几乎所有的动物细胞中都能发现NF-κB，它们参与细胞对外界刺激的响应，如细胞因子、辐射、重金属、病毒等。在细胞的炎症反应、免疫应答等过程中NF-κB起到关键性作用。NF-κB的错误调节会引发自身免疫病、慢性炎症以及很多癌症。NF-κB也与突触的可塑性、记忆有关。

应用^[4][5]

用于Bcl-3对HTLV-1感染细胞生长的影响及其作用机制研究

人类T细胞白血病1型病毒(HTLV-1)是一种感染CD4+、细胞和树突状细胞的逆转录病毒,它是成人T细胞白血病(ATL)的病原体。HTLV-1的病毒蛋白Tax能够利用多种细胞机制和信号途径调节细胞性状转化和病毒复制,其中,Tax诱导NF-κB通路的持续激活被认为是导致ATL的主要原因。

Bcl-3是IκB家族中的分子,它能够促进或抑制NF-κB依赖的基因的转录；在很多HTLV-1感染细胞系和ATL细胞中均发现Bcl-3表达量增高,但Bcl-3在HTLV-1致病过程中的作用机制仍不明确。的研究在HTLV-1感染的细胞中沉默Bcl-3对细胞生长增殖,DNA损伤以及NF-κB活性的影响。

方法1.RT-PCR与Western blot:培养MT2、Jurkat、IM9、THP-1、MT4五种细胞系,检测Bcl-3mRNA与蛋白质的表达量；在MT2细胞中转染Bcl-3shRNA,检测Bcl-3mRNA与蛋白质的表达情况；

2. 免疫荧光检测：分别在Tax转染的Jurkat细胞系以及持续表达Tax的TaxP细胞系中观察Bcl-3与P65的核转位情况；

3. 彗星实验：在MT2细胞中转染Bcl-3shRNA,检测其对细胞DNA损伤的影响；4.MTT检测：在MT2细胞中转染Bcl-3shRNA质粒,检测其对细胞生长的影响；

4. 荧光素酶活性检测：将pNF-κB-luc质粒与Bcl-3shRNA质粒共转染[axN与TaxP细胞,观察沉默Bcl-3对NF-κB活性的影响。

结果：实时定量PCR和Western blot检测发现Bcl-3的mRNA及蛋白表达量在HTLV-1感染的细胞系高于HTLV-1未感染的细胞系。

参考文献

[1]Effect of propolis and caffeic acid phenethyl ester(CAPE)on NFκB activation by HTLV-1 Tax[J].Jenny Shvarzbeyn,Mahmoud Huleihel.Antiviral Research.2011(3)

[2]Activation of host pattern recognition receptors by viruses[J].Kiva Brennan,Andrew G Bowie.Current Opinion in Microbiology.2010(4)

[3]HTLV-1 bZIP factor gene:Its roles in HTLV-1 pathogenesis[J].Masao Matsuoka.Molecular Aspects of Medicine.2010(5)

[4]Activation of the PI3K–Akt pathway by human T cell leukemia virus type 1(HTLV-1)oncoprotein Tax increases Bcl3 expression,which is associated with enhanced growth of HTLV-1-infected T cells[J].Kousuke Saito,Mineki Saito,Naoko Taniura,Takako Okuwa,Yoshiro Ohara.Virology.2010(2)

[5]高彩.Bcl-3对HTLV-1感染细胞生长的影响及其作用机制[D].新乡医学院,2014.