中性红染色液(活细胞专用)的产品组成和操作步骤

背景及概述^[1-2]

中性红是分子式C15H17ClN4。分子量288.78。50%乙醇中得深绿色粉末。UVλmax533nm。pKa＝6.7。溶于水或醇，呈红色。在水、无水乙醇、乙二醇-乙醚中溶解度分别为4%、1.8%及3.75%，不溶于二甲苯。LD50142mg/kg(小白鼠)。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌。由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色。死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色。

中性红染色液(活细胞专用)(NeutralRedStainingSolution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液。本染色液配制在pH值较接近中性的，并且和普通的细胞培养液等渗的溶液中，可以用于外周血细胞的活体染色，也可以用于其它活体细胞或组织的染色。

操作步骤^[1]

1、样品处理：去除细胞培养液，用PBS清洗或生理盐水清洗1次。

2、中性红染色：弃PBS，加入适量的中性红染色液(活细胞专用)完全覆盖细胞，染色2～10min。

3、用PBS清洗或生理盐水清洗1次，立即观察或拍照。

注意事项^[1]

1、中性红染色液(活细胞专用)长期存放会产生少量沉淀，一般不影响使用。

2、使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。

3、中性红染色液时，可以根据染色结果和要求调整时间。

主要参考资料

[1] 中性红染色液(活细胞专用)操作说明

[2] 化合物词典