细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)的应用和操作步骤

背景及概述^[1-2]

细胞色素氧化酶（CO）又称细胞色素aa3。在呼吸链末端催化分子氧氧化还原态细胞色素C的一种末端氧化酶。系统名称为亚铁细胞色素C：氧化还原酶，EC1.9.3.1。由两个血红素a、两个铜原子和几种分子量不同的蛋白质组成的复合物。处于呼吸链(电子传递链)的末端，将还原态细胞色素C的电子传递给分子氧，使分子氧还原成水，也是一种末端电子传递体。

细胞色素氧化酶广泛存在于微生物、植物和动物体内，嵌入在原核细胞质膜和真核细胞线粒体内膜的磷脂双分子层中，是生物有氧呼吸中最重要的氧化酶。细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)主要由Co孵育液、Lugol碘液、硫代硫酸钠溶液、钴盐溶液、阴性对照等组成，染色后酶活性部位呈棕绿色。细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)以N-苯基对苯二胺为底物，在有氧存在的情况下，经细胞色素氧化酶作用可与萘酚生成有色的靛酚蓝。

组成^[1]

操作步骤^[1]

1. 冰冻切片，后6μm，不固定。
2. 切片入细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)孵育液内，室温孵育20分钟。
3. 切片入Lugol碘液，孵育3分钟。
4. 入海波溶液处理1分钟，
5. 入配置好的细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)，分化30秒，
6. 流水冲洗3分钟，
7. 常规脱腊透明，中性树胶封固。

主要参考资料

[1] 细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)操作说明

[2] 农业大词典