网状纤维染色液(改良GOMORI银氨法)的原理和操作步骤

背景及概述^[1]

网状纤维(Reticularfiber)是网状结缔组织内的一种纤维，由网状细胞所产生，直径多在0.2～1.0μm，有韧性而没有弹性。网状纤维的染色方法很多，但染色原理基本一致，大都采用氨银浸法。改良Gomori网状纤维染色原理是利用氨银液易被组织吸附与组织的蛋白质结合，经甲醛还原成黑色或棕黑色的金属银，沉积于组织内及其表面。传统方法中还原后先采用氯化金调色，再用硫代硫酸钠溶液洗去组织上未还原的银盐，本改良法省略该步骤，使网状纤维对比得更清晰。

网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)主要经过氧化、漂白、媒染、浸银、还原步骤，与改良Gordon-Sweets法不同之处在于后者采用酸性氧化剂和核固红复染液。冰冻切片、低温切片和火棉胶切片均可用于网状纤维染色，各种固定液均可采用，重金属汞盐或锇盐固定液偶尔会产生一些非特异性银背景。网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)常用于鉴别肿瘤的性质和来源、癌与肉瘤、淋巴肉瘤与网状细胞肉瘤、血管内皮瘤与血管外皮瘤、骨尤文瘤与骨网状细胞肉瘤、脑膜瘤与星形细胞瘤、恶性神经鞘瘤及早期浸润癌等。

操作步骤

1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。

2、切片厚4μm，常规脱蜡至水。

3、把切片平置在染色架上，滴加Gomori氧化剂，氧化5min。

4、稍水洗

5、入草酸溶液漂白1～2min。

6、流水冲洗2min，蒸馏水稍洗。

7、硫酸铁铵溶液媒染5min。

8、稍水洗，蒸馏水稍洗。

9、滴加网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)染色3min。

10、蒸馏水稍洗。

11、Gomori还原剂还原1min。

12、流水冲洗10min。

13、常规脱水透明，中性树胶封固。

注意事项

1、玻璃器皿必须用洗涤液浸泡1天，自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗2次。

2、10%福尔马林固定液是较为适合的固定液，不宜采用含汞的固定剂如Zenker液，否则易导致切片非特异性沉淀。

3、网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)不太稳定，对光的敏感性强，应4℃避免保存，恢复至室温后使用。

主要参考资料

[1] 网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)操作说明