ATP合酶亚基O抗体的应用

背景^[1][2]

ATP合酶亚基O抗体是可以特异性结合ATP合酶亚基的一类多克隆抗体。ATP合酶，又称FoF₁-ATP酶在细胞内催化能源物质ATP的合成。在呼吸或光合作用过程中通过电子传递链释放的能量先转换为跨膜质子(H+)梯差，之后质子流顺质子梯差通过ATP合酶可以使ADP+Pi合成ATP。ATP合酶（ATP synthase）广泛分布于线粒体内膜，叶绿体类囊体，异养菌和光合菌的质膜上，参与氧化磷酸化和光合磷酸化，在跨膜质子动力势的推动下合成ATP。

分子结构由突出于膜外的F1亲水头部和嵌入膜内的Fo疏水尾部组成。ATP或称F0F1复合物(F0F1 complexes),该酶在分离状态下具有ATP水解酶的活性,在结合状态下具有ATP合酶的活性,属F型ATPase。除了线粒体中有ATP合酶外,植物叶绿体的类囊体和好氧细菌都有ATP合酶的同源物,ATP合酶的分子组成和主要特点是:

头部:头部即F1,细菌和线粒体ATP合酶的F1都是水溶性的蛋白,结构相似,由5种多肽(α、β、γ、δ和ε)组成的九聚体(α3β3γδε)，α亚基和β亚基构成一种球形的排列,头部含有三个催化ATP合成的位点,每个β亚基含有一个。

柄部∶由F1的γ亚基和ε亚基构成柄部,将头部与基部连接起来。γ亚基穿过头部作为头部旋转的轴。构成基部的亚基b向外延伸成为柄部的构成部分。

基部∶基部称为F0,是由镶嵌在线粒体内膜的疏水性蛋白质所组成,由3种不同的亚基组成的十五聚体(1a:2b:12c)。其中c亚基在膜中形成物质运动的环,b亚基穿过柄部将F1固定;a亚基是质子运输通道,允许质子跨膜运输。

应用^[3][4]

用于大鼠踝关节周围肌肉Atp5O、Atpase、Sdh mRNA表达的实验研究

麻醉处死大鼠后剥离踝关节肌肉和滑膜组织,采用qRT-PCR技术检测大鼠踝关节局部肌肉组织Atp5O、Atpase、Sdh mRNA的表达,病理切片观察滑膜组织结构。

结果:1热补针法对RA大鼠关节炎积分的影响模型组大鼠关节炎积分较平补平泻组和热补针法组明显增高(P<0.05);平补平泻组和热补针法组干预后关节炎积分较模型组显著降低(均P<0.05);但热补针法组关节炎积分低于平补平泻组(P<0.05)。2热补针法对RA大鼠足跖厚度的影响模型组大鼠右后足跖厚度较正常组明显增厚(P<0.05),平补平泻组和热补针法组针刺后右后足跖厚度较模型组明显变薄(P<0.05),热补针法组足跖厚度改善明显优于平补平泻组(P<0.05)。3热补针法对RA大鼠关节滑膜组织病理形态学的影响正常组大鼠滑膜组织结构基本正常;模型组大鼠滑膜组织结构异常,滑膜B淋巴细胞增多,纤维结缔组织增生,可见新生血管;平补平泻组和热补针法组大鼠滑膜组织结构有所改善,热补针法组改善程度优于平补平泻组。4热补针法对RA大鼠Atp5O、Atpase和Sdh mRNA表达的影响与正常组比较,模型组Atp5O mRNA和Sdh mRNA表达均明显降低(均P<0.05),Atpase mRNA表达无明显变化(P>0.05)。

与模型组比较,平补平泻组Atpase mRNA表达明显升高(P<0.05),Atp5O mRNA和Sdh mRNA表达无明显差异(均P>0.05);热补针法组Atp5O mRNA、Atpase mRNA和Sdh mRNA表达均明显升高(均P<0.05)。与平补平泻组比较,热补针法组Atp5O mRNA、Atpase mRNA和Sdh mRNA表达均明显升高(均P<0.05)。

结论:(1)热补针法能明显上调RA大鼠踝关节周围肌肉Atp5O、Atpase、Sdh mRNA的表达。(2)热补针法能显著降低RA大鼠关节炎症积分,足跖厚度。(3)上调能量代谢相关上游基因Atp5O、Atpase、Sdh mRNA表达是热补针法“取热”特性的分子生物学机制之一。

参考文献

[1]Synovial Hypoxia as a Cause of Tendon Rupture in Rheumatoid Arthritis[J].Branavan Sivakumar,Mohammed A.Akhavani,C.Peter Winlove,Peter C.Taylor,Ewa M.Paleolog,Norbert Kang.Journal of Hand Surgery.2008(1)

[2]Human CD4+T cells maintain specific functions even under conditions of extremely restricted ATP production[J].Eur.J.Immunol..2008(6)

[3]The integrated response of the human cerebro-cerebellar and limbic systems to acupuncture stimulation at ST 36 as evidenced by fMRI[J].Kathleen K.S.Hui,Jing Liu,Ovidiu Marina,Vitaly Napadow,Christian Haselgrove,Kenneth K.Kwong,David N.Kennedy,Nikos Makris.Neuroimage.2005(3)

[4]张星华.热补针法调控风寒湿痹证RA大鼠踝关节周围肌肉Atp5O、Atpase、Sdh mRNA表达的实验研究[D].甘肃中医药大学,2016.