8号染色体开放阅读框74抗体的应用

背景^[1-3]

8号染色体开放阅读框74抗体是可以特异性结合8号染色体开放阅读框74重组蛋白的免疫蛋白。其是将8号染色体开放阅读框74重组蛋白注射到无菌动物体内进行系统免疫后在其血清中纯化制得的高纯度免疫蛋白。8号染色体开放阅读框74抗体主要用于8号染色体开放阅读框74的免疫组化实验。

免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。

应用^[4][5]

用于新生大鼠半横切脊髓内胚胎脊髓移植后大脑皮层cDNA差示文库构建及部分相关基因分析

提供适当条件后损伤的CNS能够再生，轴突的再生是由神经元固有的特性和其所处的环境暗示(environmental cues)共同决定的。影响CNS再生的因素很多，主要分为内在因素和外在因素两个方面，内在因素是指与CNS神经元轴突中断有关的基因表达，外在因素是指CNS中抑制轴突再生的分子和/或物理屏障。影响轴突生长外在因素也能通过诱导内在的神经基因的表达变化而发挥作用。实验证明直接给予损伤神经元胞体营养因子处理可逆转细胞萎缩，增强生长相关蛋白-43(GAP-43)和Tα-1微管蛋白(Tα-1 tubulin)mRNA表达，促进轴突再生。内在因素方面，CNS神经元在轴突中断后基因表达在数量及种类上与PNS明显不同，寻找并增强再生相关基因中关键基因的表达,以促进CNS损伤后轴突再生和/或出芽的反应是神经科学研究的重要方向。

研究表明，新生大鼠CNS的再生能力强于成年大鼠，而应用胚胎脊髓移植处理脊髓损伤后的新生大鼠,与未处理的新生大鼠有更强的再生能力。提示，接受胚胎脊髓移植后，可能刺激新生大鼠的神经元表达功能更有意义的再生相关基因。给予胚胎脊髓移植组对侧大脑皮层中的H3表达，与未移植组和未损伤组有显著性差异，移植组强于未移植组，未移植组强于未损伤组；提示H3可能与再生关系密切。分析该基因定位于大鼠第8号染色体q31。电子克隆获得长度1635bp,开放阅读框位于49-591bp,结构分析符合Cozak规则。

参考文献

[1]Suppression of the onset of myelination extends the permissive period for the functional repair of embryonic spinal cord.Keirstead HS,Hasan SJ,Muir GD et al.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.1992

[2]Fetal spinal cord transplants support growth of supraspinal and segmental projections after cervical spinal cord hemisection in the neonatal rat.Diener PS,Bregman BS.The Journal of Neuroscience.1998

[3]Beta-actin immunoreactivity in rat microglial cells:developmental pattern and participation in microglial reaction after kainite injury.Plantier M,Der Terrossian E,Represa A.Neuroscience Letters.1998

[4]Endogenous brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin-3 antagonistically regulate survival of axotomized corticospinal neurons in vivo.Giehl KM,Rohrig S,Bonatz H,et al.The Journal of Neuroscience.2001

[5]马海涵.新生大鼠半横切脊髓内胚胎脊髓移植后大脑皮层cDNA差示文库构建及部分相关基因分析[D].第三军医大学,2003.