8号染色体开放阅读框55抗体的应用

背景^[1-3]

8号染色体开放阅读框55抗体是可以特异性结合8号染色体开放阅读框55酶的免疫蛋白。8号染色体开放阅读框55酶抗体是将8号染色体开放阅读框55酶注射到无菌动物体内进行系统免疫后在其血清中纯化制得的高纯度免疫蛋白。染色体（chromosome）是遗传物质，基因的载体，人类的常染色体是成对存在的。

开放阅读框（ORF）开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)是基因序列中的一段无终止序列打断的碱基序列，可编码相应的蛋白。当一个新基因被识别，其DNA序列被解读，人们仍旧无法搞清相应的蛋白序列是什么。这是因为在没有其它信息的前提下，DNA序列可能按六种框架阅读和翻译（每条链三种，对应三种不同的起始位点）。ORF识别包括检测这六个阅读框架并决定哪一个包含以启动子和终止子为界限的DNA序列而其内部不包含启动子或终止子，符合这些条件的序列有可能对应一个真正的单一的基因产物。ORF的识别是证明一个新的DNA序列为特定的蛋白质编码基因的部分或全部的先决条件。在构成基因的核苷酸序列中存在着一些最终翻译成蛋白的碱基段，每三个连续碱基(即三联“密码子”）编码相应的氨基酸。其中有一个起始“密码子”--AUG/ATG和三个终止“密码子”，终止“密码子”提供终止信号。当细胞机器沿着核酸合成蛋白链并使其不断延伸的过程中遇到终密码子时，蛋白的延伸反应终止，一个成熟（或提前终止的突变）蛋白产生。因此开放阅读框是基因序列的一部分，包含一段可以编码蛋白的碱基序列。由于拥有特殊的起始密码子和直到可以从该段碱基序列产生合适大小蛋白才出现的终止密码子，该段碱基序列编码一个蛋白。

应用^[4][5]

用于人睾丸特异表达基因HSD-3.8编码蛋白质的功能研究

受精是雄性和雌性生殖细胞之间极为复杂的相互作用过程，有赖于一系列事件在正确的时间准确地按部就班地完成。体内正常成功的受精离不开功能完整的精子，后者的成熟对于受精不可缺少。此外，成熟精子还需克服一些障碍并且经历许多动态变化才能到达其最终的目的地，在那里将其自身的DNA释放入卵。在精子成熟和参与受精过程中，有许多睾丸特异表达的基因在调控因子的作用下，以既定的时空秩序开放或关闭。

多年来许多生殖学家致力于精子发生、受精等过程的分子机理研究，寻找与之相关的分子开关。HSD-2.4就是本实验室既往发现的人睾丸特异表达并与受精和／或精子发生有关的基因。HSD-2.4是以不孕妇女血清先后筛选人睾丸λgt11表达文库和人睾丸cDNA文库所获得的人睾丸特异表达的基因。其开放阅读框架为2447bp，编码548个氨基酸。对HSD-2.4的全长进行了扩增，得到其全长cDNA序列，命名为HSD-3.8。利用重叠区扩增基因拼接法成功获得了HSD-3.8编码区cDNA片段，为以后全面研究该基因奠定了基础。HSD-3.8基因全长3818bp，编码蛋白质全长926个氨基酸，GenBank接收号为AF311312。根据基因组信息学分析显示该基因定位于8号染色体上，由19个外显子和18个内含子组成。亲疏水性分析提示HSD-3.8全长cDNA编码蛋白质是一个亲水性较强的蛋白质，没有明显的疏水区域。SMART和Prosite软件对该蛋白质进行结构域分析，确认HSD-3.8编码蛋白质具有糖基化位点、PKC磷酸化位点、CK-2磷酸化位点、酪氨酸激酶磷酸化位点、豆蔻酸化位点、酰胺化位点、ATP／GTP结合位点基序A(P—loop)，以及三个TPR区，每个TPR区又分别由三个TPR基序构成。

参考文献

[1]Hatzivassiliou,E.Izumi,K.M.Kaye,K.M.Kleijnen,M.F.Kieff,E.and Mosialos,G.1996.Association of TRAF1,TRAF2,and TRAF3 with an Epstein-Barr virus LMP1 domain important for B-lymphocyte transformation:Role in NF-k B activation.Devergen,O.Molecular and Cellular Biology.

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[3]Notrica JA and Polak de Fried E.1997.Male immunologic infertility:sperm performance on in vitro fertilization.Vazquez-Levin MH.Fertility and Sterility.

[4]Tomasetto,C,Moog-Lutz,C,Chenard,M.P.Wendling,C,Basset,P.and Rio,M.C.1995.Presence of a new conserved domain in CART1,a novel member of the tumor necrosis factor receptor-associated protein family,which is expressed in breast carcinoma.Regnier,C.H.Journal of Biological Chemistry.

[5]林雯.人睾丸特异表达基因HSD-3.8编码蛋白质的功能研究[D].中国协和医科大学,2002.