POLY-D-LYSINE/多聚赖氨酸的应用

背景^[1-3]

Poly-D-lysine的中文名为多聚赖氨酸，简称PDL。本Poly-D-lysine为Poly-D-lysine hydrobromide.Poly-L-lysine和Poly-D-lysine都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。

如果遇到Poly-L-lysine有细胞毒性的情况，可以考虑选购Poly-D-lysine。多聚D-赖氨酸是带高正电荷合成氨基酸连，常用来作为包被剂能促进细胞黏附在TCT塑料或者玻璃表面。

此外，它还能抵抗酶降解，促进大量神经细胞的增殖和分化。该试剂即用浓度为0.01%，其包含聚合酶范围为70,000-150,000 kDa。

应用^[3]

用于钙池调控的钙离子内流在高血糖诱导的神经元损伤中的作用机制研究

糖尿病(diabetes mellitus,DM)是由遗传和环境因素共同导致的以慢性高血糖为主要特征的临床综合征。糖尿病可引起多种慢性并发症,导致肾、视网膜等多器官功能障碍或衰竭,严重者可致残或致死。有关糖尿病引起的神经系统并发症的研究多集中在周围神经系统,主要是糖尿病引起的周围神经病变。近年来的研究表明糖尿病同样引起中枢神经系统并发症,主要表现为糖尿病认知功能障碍(diabetic cognitive dysfunction)。海马是边缘系统的一部分,主要与学习和记忆功能有关。糖尿病认知功能障碍与高血糖导致的海马组织损伤密切相关。但是高血糖导致的海马神经元损伤的分子机制复杂,至今尚未完全明确。因此,探索高血糖导致的海马神经元损伤的具体机制对于预防糖尿病所致的认知功能障碍和提升糖尿病患者的生存质量具有重大的意义。

钙离子(calcium ion,Ca2+)是细胞内常见的第二信使之一,它参与了诸如增殖、转录、胞吐、凋亡等细胞生理或病理过程。钙离子内流的主要通道包括电压调控钙离子通道、受体激活钙离子通道和钙池调控的钙离子通道。其中钙池调控的钙离子通道(store-operated calcium channels,SOCs)是包括神经元在内的多种细胞中钙离子内流的主要通道之一,它主要由基质相互作用分子(stromal interaction molecule,STIM)和钙释放激活的钙通道蛋白(calcium release-activated calcium channel protein,CRAR,也叫做Orai)组成。STIM是一个定位在内质网膜上的单次跨膜蛋白,它的主要作用为监测内质网腔中钙离子浓度。而Orai主要构成了细胞膜上的钙离子通道。钙池调控的钙离子内流(store operated calcium entry,SOCE)与钙平衡之间关系密切,当内质网中的钙离子浓度降低,STIM转位到细胞膜从而激活Orai等构成的钙离子通道,促进钙离子内流以提高内质网腔钙离子浓度,并为细胞浆补充钙离子。

钙离子在高糖导致的神经元损伤中的作用目的：通过检测高糖刺激之后神经元的损伤情况以及细胞浆中游离钙离子浓度(cytoplasmic free Ca2+concentration,[Ca2+]cyt),在此基础上给予细胞内外钙离子螯合剂后,再次检测细胞浆中钙离子浓度以及神经元的损伤情况,探讨钙离子在高糖诱导的神经元损伤中的作用。方法：1.细胞培养：取18天孕龄的SD孕鼠,按照常规步骤取脑、剪碎、消化及计数后,将神经元接种于含Neurobasal+B27培养基且预先铺有多聚赖氨酸(Poly-D-lysine,PDL)的6孔板或96孔板中,置于37℃、5%CO2培养箱中培养。每3天进行半量换液。

参考文献

[1] 李树峰.电场导向螺旋神经元神经突生长的体外实验研究[D].复旦大学,2008.

[2] 李肖.用于外周神经修复与神经接口的轴突牵拉生长研究[D].华中科技大学,2017.

[3] 徐振宽.钙池调控的钙离子内流在高血糖诱导的神经元损伤中的作用机制研究[D].山东大学,2016.