牡丹皮提取物

【背景及概况】^[1][2][3]

牡丹皮又名丹皮、粉丹皮、条丹皮、木巧药，始载于《神农本草经》，系毛食科芍药属植物牡丹化的干燥根皮。主产于安徽、山东、河北等地，全国范围内均有种植，《本草纲目》记载牡丹皮具有＂滋阴降火，解斑毒，利咽喉，通小便血滞＂的作用。牡丹作为观赏花卉，已有几千年历史，有“白术”“花王”之称。作为药物使用，在药物书中最早见于《神农本草经》。在医方书中，马王堆出土文物就有关于牡丹药用的最早记载。后汉末期张仲景著《金匮要略》，对牡丹的药用作了更进一步的论述。之后的《名医别录》《吴普本草》《本草经集注》等书也竞相载入。宋代出版的《图经本草》详细记载了牡丹的药性、形态及产地，并附有牡丹图，叫做“滁州牡丹”，是本草书中现有最早的牡丹图，《本草纲目》也借引了此图。牡丹皮作为常用中药材，主产于安徽铜陵、重庆垫江及山东荷泽等地，是重庆的主要传统道地药材之一。

牡丹皮提取物有酚及酚苷类，单萜及苷类化合物，三萜、甾醇及其苷类、其他成分。其中，酚及酚苷类是牡丹皮提取物含量较高的一类化合物，主要是以丹皮酚为母核所衍生的一系列苷类化合物。单萜及其苷类化合物是牡丹皮提取物中主要化合物，目前已分离到近20个该类化合物。该类化合物主要是芍药苷元及其类似物与葡萄糖缩合而成的单萜苷类，葡萄糖上还可以连接苯甲酰基和没食子酰基。该类化合物性质不稳定，容易形成互变异构体。三萜、甾醇类成分不多，目前只报道了7个化合物。其他成分包括槲皮素、6-羟基香豆素、没食子酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸、反式咖啡酸硬脂酸酯及腺苷等。

【组成】^[2]

1. 苯乙酮类

丹皮酚是牡丹皮植物的代表性化合物，苯乙酮类化合物的结构特点是丹皮酚母核与糖结合生成糖苷类。其中丹皮酚含量约占牡丹皮的1-2％。

2. 单萜及其苷类

单萜类化合物作为芍药属的代表性成分广泛存在各个属内植物，目前为止发现29种化合物，它们以芍药苷为基本母核结构，其结构特征为蒎烷母核结构，通过连接葡萄糖、没食子酸、对羟基苯甲酸等不同取代基构成不同化合物，部分结构如下：

3. 苯酚类

苯酚类化合物苯环上连有羟基而具有微弱的酸性，此类化合物含有较多的酚羟基，结构相对简单，苯酚、没食子酸等以苯环为基本骨架，个别连接葡萄糖基团，部分结构如下：

4. 三萜类

大部分三萜化合物是由30个碳原子组成，且为6个异戊二烯缩合所得，同时多具有羧基基。牡丹皮提取物中已发现6中三萜化合物，分别为典型三萜结构、熊果酸型三萜、四环三萜。

5. 甾体类

甾体类化合物天然广泛存在，种类很多，牡丹皮提取物中已发现多种甾体物质，其结构为环戊烷骈多氢菲所组成，四个环稠和方式可不同。

6. 鞣质类

牡丹皮提取物内发现的鞣质类化合物目前有十种，它们是一类结构比较复杂的多元酚类化合物，结构特点为没食子酸与一分子或多分子葡萄糖（五碳糖）连接，能与蛋白质结合形成不溶于水的沉淀。

7. 黄酮类

黄酮类化合物是一种在植物中广泛分布的天然产物，结构特征是C6-C3-C6为基本骨架，生理活性多种多样，在植物的各个生长阶段均发挥重要作用。牡丹皮提取物中发现的黄酮类化合物主要是儿茶素，栅皮素，山奈酚三种。

【提取】^[1]

1. 煎煮法

将牡丹皮药材 50 g，加入到 10 倍量的沸水中，煎煮5 min，滤过。药渣同法再煎煮 1 次，滤过，合并滤液并测定体积。计算可得总牡丹皮提取物收率 7.56% ； 丹皮酚的提取率为 1.15% ，转移率为 41.1% 。

2. CO2 超临界流体萃取法

将牡丹皮 350 g 用 CO₂超临界流体萃取装置萃取。条件如下： 萃取温度 35 ℃ ，萃取压力 22 MPa，解析温度 38 ℃ ，解析压力 22 MPa，萃取时间 3h，CO₂流量 27L/h。牡丹皮提取物为淡红棕色液体，重 25.48 g，总收率为7.28% 。提取物加适量乙醇，使其溶解成均一溶液，转入100 m L 量瓶中，乙醇稀释至刻度。精密吸取该溶液 1 mL，紫外分光光度法测定丹皮酚量，提取率为0.31%，转移率为 1.11% 。

3. 醇提法

以无水乙醇为溶剂，采用 40 ℃ 下回流提取或乙醇渗漉提取即可将丹皮酚提取出来。醇提法提取工艺简单，有效成分提取多，是目前提取丹皮酚的方法。醇提液的后处理困难，因为丹皮酚熔点低、挥发性强，实际生产中难以仅除去乙醇而不损失较多的丹皮酚，且提取过程中受热温度越高、时间越长，丹皮酚的含量和收率就越低。

4. 直接水蒸气蒸馏法

此法是目前最普遍的方法。以牡丹皮的提取量为指标，通过正交试验法对提取过程中加水量、蒸馏时间、蒸馏液流速 3 个因素进行筛选。结果加水量和蒸馏液流速均对丹皮酚提取量有显著影响，对蒸馏时间有极显著性影响。说明牡丹皮中丹皮酚的提取工艺为加 14 倍水量，控制蒸馏液流速按每 100g 药材为 3 m L/min，蒸馏 5 h。

【药理作用及应用】^[1][2][3]

1. 抗病原微生物

体外试验表明，牡丹皮提取物煎剂对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、变形杆菌、肺炎双球菌、霍乱弧菌等均有较强的抑制作用。煎剂抗菌的主要有效成分为没食子酸。牡丹酚对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为 1∶2000，1∶5000，1∶5000，牡丹皮浸剂在试管内对铁锈色小芽孢等 10 种皮肤真菌也有一定的抑制作用。鸡胚试验证明牡丹皮有一定抗流感病毒作用。

2. 抗心肌缺血

牡丹皮提取物可减轻试验性心肌缺血的损伤程度，降低心肌耗氧量，增加冠脉流量。故认为，牡丹皮提取物有调节血行、疏通血脉作用，因而对心肌缺血有保护作用。

3. 抗菌消炎

试验结果表明，丹皮总苷可显著抑制角叉菜胶诱导的大鼠急性足爪肿胀，以及二甲苯诱导的小鼠耳片水肿，且呈明显的剂量依赖性关系。丹皮酚灌胃或腹腔注射均能显著抑制角叉菜胶、蛋清、甲醛组胺、5-羟色胺和缓激肽性大鼠足肿、二甲苯性小鼠耳廓肿胀及醋酸和内毒素所致腹腔毛细血管通透性升高。牡丹皮的抗炎作用机制是多方面的，包括直接对抗炎症介质、抑制白细胞游走及抑制前列腺素 E2的生物合成等。

4. 保肝

丹皮酚可显著拮抗酒精性肝损伤。进一步研究发现，其作用机制与对抗肝细胞凋亡、降低血清、肝组织炎症因子水平及组织脂质过氧化水平有关。

5. 降血糖

用丹皮多糖粗品 100，400 mg/kg 灌胃给药，可使正常小鼠血糖显著降低； 200，400 mg/kg 灌胃给药，对葡萄糖诱发的小鼠高血糖有显著降低作用。

6. 对心肌细胞动作电位的作用

采用细胞内微电极记录的方法观察了牡丹皮提取液对培养心肌动作电位的影响，结果表明牡丹皮提取液对动作电位幅度、时程及 0 相上升速度均有抑制作用，可能是其作用于 Na ⁺ 通道的结果。此外，牡丹皮给药前后细胞收缩力减弱，从而使细胞能量消耗减轻、心肌耗氧量降低。

7. 调节免疫细胞

丹皮总苷对由刀豆蛋白 诱导的 T 淋巴细胞增殖和分泌，以及由脂多糖导 B 淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖和分泌功能，具有浓度依赖性双向免疫调节作用； 还可机能依赖性调节小鼠体液和细胞免疫。

8. 其他

牡丹皮还有镇痛、镇静、解痉、退热等中枢作用，抗动脉粥样硬化作用，利尿作用，抗早孕作用，抑制由二磷酸腺苷 诱导的血小板聚集等作用

【临床应用】^[1]

1. 皮肤病

有人使用肌肉注射丹皮酚注射液治疗皮肤瘙痒症 34 例，每次 4 m L，每日 2 次，用药 2 周后治愈 26例，好转 4 例。用 5% 丹皮酚霜外搽治疗湿疹、瘙痒症及接触性皮炎 102 例，总有率为 84.3% 。

2. 原发性高血压

将丹皮 30～45 g 水煎至 120～150 m L，治疗高血压 20 例，每日 3 次分服，或初次量 8～15 g，如无不良反应增至 30 g。一般服药 5 d 左右血压即有明显下降，症状改善，与服药前 6～33 d 比较，舒张压平均下降 1.15 ～ 2.15 k Pa，收缩压下降 2.15 ～4.15 k Pa。

3. 血小板减少性紫癜

用增板汤（生地、丹皮、当归、女贞子、枸杞、丹参、制首乌各 20g，旱莲草 30 g，仙鹤草 30～50 g，灵芝草 15 g，川牛膝10 g，炙甘草 6～10 g，大枣 5 枚）水煎服，治疗慢性特发性血小板减少性紫癜 250 例，每日 1 剂，每日 2 次，总有效率为 80.4% 。

4. 抗过敏性鼻炎

使用驱风、清热、通鼻窍的中药配伍牡丹皮 15 g，治疗过敏性鼻炎 32 例，结果 19 例痊愈，11 例明显好转，2 例无效。

【毒性试验】^[1]

小鼠静脉注射牡丹酚，其半数致死量分别为 196，178，3430 mg /kg。牡丹 酚磺 钠 30，60，100，200 mg/kg静脉注射给药，对麻醉犬的血压 、呼吸频率、心率及心电图均无明显影响。小鼠腹腔注射丹皮酚，对妊娠小鼠心、肝、肾和生殖系统毒性很小。大鼠每日腹腔注射牡丹酚磺酸钠 250，500，750 mg/kg，连续 30 d，对肝、肾功能均无影响； 各脏器病理检查除大剂量组（750 mg/kg）个别大鼠胃黏膜有水肿外，其余无异常改变。200，400 mg/kg 剂量对胚胎存活数及其骨髓发育无明显影响。家兔腹腔注射牡丹酚磺酸盐钠 60～200 mg/ kg，连续 30 d，除大剂量组胃黏膜增生、假膜水肿外，各脏器未见异常病理改变。

【参考文献】

[1] 周永军, 魏尊喜. 牡丹皮的研究概况[J]. 中国药业, 2012, 21(16): 111-112.

[2] 韩聪敏. 中药牡丹皮化学成分系统分离制备技术研究[D]. 大连工业大学, 2013.

[3] 傅若秋, 孟德胜, 胡大强, 等. 牡丹皮水提取物及乙醇提取物的抗菌作用研究[J]. 中国药业, 2010 (18): 29-29.