人参总皂苷的纯化及测定

背景及概述^[1][2]

人参总皂苷是一种固醇类化合物，属于三萜皂苷，主要存在于人参属药材中，例如人参、三七、西洋参等植物中，在其他科植物中也含有，例如葫芦科绞股蓝。目前研究表明人参总皂苷具有多种生物活性，例如抗肿瘤作用，人参皂苷Rh2对多种肿瘤有一定的抑制作用，并且Rh2与紫杉醇或盐酸米托蒽醌联合应用有增效作用；增强机体应激能力，调整内分泌和植物神经功能紊乱，抗疲劳并具有增强心肌收缩力，提高心脏排血量的功能。目前临床上用于肿瘤辅助用药、冠心病、更年期综合征。

纯化^[2]

A、将DM-130型大孔吸附树脂填装于层析柱内，用酒精淋洗至流出酒精于水中不产生白色浑浊；用去离子水洗净层析柱内树脂中的酒精，备用；将BS-Ⅱ型弱碱脱色树脂填装于层析柱内，分别用1NHCl、1NNaOH进行转型处理，然后用去离子水洗净组内的NaOH，备用；

B、以30ml/h的流速使人参皂苷提取物粗品溶液首先通过DM-130型大孔吸附树脂层析柱，吸附药液中的人参皂苷；吸附完毕后用去离子水洗去层析柱内残留的人参皂苷溶液；用85%的酒精洗脱大孔树脂吸附的皂苷；

C、上述洗脱液再通过BS-Ⅱ型弱碱脱色树脂柱进行脱色处理；收集脱色树脂柱流出液；真空浓缩并干燥即得高含量人参总皂苷纯化产品。

测定^[3]

某含参类酒的人参总皂苷测定：

精确吸取该酒样5ml于100ml瓷蒸发皿中，在沸水浴中蒸干，挥发去除乙醇，用蒸馏水转移至50ml容量瓶中，并定溶至刻度，摇匀，干滤纸过滤，精确吸取滤液1ml上柱，样品上柱后，先用50ml蒸馏水洗涤杂质，再用25ml20％(V/V)的乙醇水溶液洗涤杂质，洗去杂质后，用25ml70％(V/V)乙醇洗脱吸附在柱上的人参总皂苷，用100ml瓷蒸发皿接收洗脱液，在沸水浴中蒸干，同时，精确吸取100μg/ml由中国药品生物制品检定所销售的人参皂苷Re标准品1ml，按照与上述样品上柱、洗涤、洗脱、收集、蒸干同样方式进行。

向蒸干的样品和标准品中分别准确加入2ml蒸馏水，将蒸干的人参总皂苷荡入底部。另取一只洁净的100ml瓷蒸发皿，同样加入2ml蒸馏水作为试剂空白。再分别向样品、标准品、试剂空白中准确加入本发明制备的6ml0.2％(g/L)蒽酮显色剂，在90℃水浴上加热15min，放至室温，用天津喀纳斯光学分析仪器有限公司销售的721型分光光度计，在波长590nm处以空白校零，再分别测定样品和标准品吸光度，若测得样品的吸光度为0.421，标准品吸光度0.325，则误差：在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算数平均值的10％。

主要参考资料

[1][中国发明]CN201510434102.9一种人参总皂苷滴丸及其制备方法

[2][中国发明]CN201810755117.9兽用人参总皂苷颗粒

[3][中国发明,中国发明授权]CN200910176478.9一种蒽酮比色法测定人参总皂苷的方法