醋酸鲑鱼降钙素的合成与临床应用

背景及概述[1][2]

醋酸鲑鱼降钙素为一条由32个氨基酸组成的单链，其N-末端7个氨基酸环化为二硫键。由于鲑鱼降钙素与人降钙素受体结合部位有很高的亲和力，所以比合成的哺乳类降钙素的效果更好、作用时间更长。鲑鱼降钙素通过其特异性受体，抑制破骨细胞活性。在骨吸收率增加的情况下，如骨质疏松症时，它能明显降低骨转换，甚至可使骨转换正常化。已证明鲑鱼降钙素对动物模型和人类有止痛作用，可能是直接作用于中枢神经系统的结果。因此，临床上主要用于治疗早期和晚期绝经后骨质疏松症以及老年性骨质疏松症、继发于乳腺癌、肺癌或肾癌、骨髓瘤和其他恶性肿瘤骨转移所致的高钙血症以及变形性骨炎。

目前醋酸鲑鱼降钙素的合成方法是利用Fmoc策略固相法合成鲑鱼降钙素，主要包括以下步骤：Fmoc-RinkAmideMBHA树脂或RinkAmideAM树脂脱Fmoc-保护后按照固相合成的方法依次连接各种保护氨基酸得到保护三十二肽树脂；其间依次脱去Fmoc保护基团；脱侧链保护基团及裂解肽同步进行，得还原型粗品；粗品经弱碱空气氧化反应，并经反相HPLC分离纯化，制得醋酸鲑鱼降钙素精品。但是由于鲑鱼降钙素由32个氨基酸组成，固相逐步合成方法产品收率低(15-20％)，而且产品纯化困难，不易得到高纯度的鲑鱼降钙素。其他如专利公开了基因重组生产鲑鱼降钙素，然而基因表达有着工作量大、三废严重、无法大规模生产等缺点。所以本领域技术人员仍然期待以高产品收率获得具有良好品质产品的方法。    

制备[2]

三片段制备醋酸鲑鱼降钙素。

1.树脂的合成

1）合成Fmoc-Gly-2-氯-三苯甲基氯树脂

2）合成Fmoc-Pro-2-氯-三苯甲基氯树脂

2.片段合成

1）合成肽片段序列Boc-AA(1-10)-OH 

2）合成肽片段序列Fmoc-AA(11-23)-OH的：

3）合成肽片段序列H-AA(24-32)-NH2 

3.片段缩合过程

1）通过液相片段缩合合成Fmoc-AA(11-32)-NH2 

2)合成H-AA(11-32)-NH2

4.鲑鱼降钙素的裂解及纯化

1)通过去除侧链保护Boc-AA(1-32)-NH2合成鲑鱼降钙素粗肽

2）HPLC纯化鲑鱼降钙素粗肽

规格[3]

注射液：1ml∶50单位；1ml∶100单位；1ml∶200单位。鼻喷剂：2ml∶4400单位。

临床应用[3]

(1)不能使用常规雌激素与钙制剂联合治疗的早期和晚期绝经后骨质疏松症以及老年性骨质疏松症。(2)继发于乳腺癌、肺癌或肾癌、骨髓瘤和其他恶性肿瘤骨转移所致的高钙血症。(3)变形性骨炎。(4)痛性骨病。

禁忌证[3]

对降钙素过敏者、妊娠期及哺乳期妇女。

主要参考资料

[1] 毛细管气相色谱法测定人工合成鲑鱼降钙素中醋酸的含量

[2] CN201410420967.5片段缩合制备醋酸鲑鱼降钙素的方法

[3] 北京地区医疗机构处方集•西药分册