枳实黄酮

【概述】

枳实黄酮，由枳实中提取而得。具有抗氧化、抗菌与抗病毒、抗癌与抗肿瘤、抗炎,调节免疫活性、治疗心血管疾病、解毒护肝、影响内分泌和代谢等药理作用。

【来源】

枳实“是中医临床的常用药物之一,最早记载于《神农本草经》“枳实,生河内川泽,积壳生商州山谷,今京西江湖州郡皆有之,以商州者为佳。如橘而小,高亦五、七尺,叶如根,多刺。春生白花,至秋成实。九月、十月采,阴干。七月、八月采者为实,九月、十月采者为壳。今医家多以皮厚而小者为积实,完大者为壳,皆以翻肚如盆口唇状,须陈久者为胜。近道所出者,俗呼臭橘,不堪用。”枳实具有破气消积、化痰散痞的作用,用于治疗积滞内停、痞满胀痛、泻痢后重、大便不通、结胸、胃下垂、脱肛、子宫脱垂等症'。

图1为枳实

【成分】

枳实中黄酮类化合物主要有橙皮有、柚皮苷、新橙皮苷、以及酸橙素、苦橙苷、枸桔苷、苦橙丁等。

【理化性质】

（1）黄酮类化合物多为结晶性固体,少数为无定形粉末。黄酮类化合物的分子结构中,大多带有酚轻基,因此具有酚类化合物的通性。

（2）另外,分子中还常带有毗酮环或碳基,构成了生色团的基本结构,根据羟基的数目,结合的位置与交叉共扼体系,构成了黄酮类化合物的呈色。黄酮、黄酮醇及其苷类多为灰黄至黄色双氢黄酮、双氢黄酮醇无交叉共轭体系一般不显色；异黄酮类因共扼体系较短,显微黄色花色素所显颜色与有关,不同的条件下会呈现出红、紫、蓝等颜色。

（3）对于黄酮苷元,分子内含有不对称碳原子的双氢黄酮、双氢黄酮醇、黄烷醇、双氢异黄酮及其衍生物,具有旋光性,其余苷元则无旋光性。黄酮苷类因结构中含有糖的分子,均含有旋光性,且多为左旋。

（4）黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态苷或苷元,单糖苷,双糖苷或三糖苷不同而有很大差异。一般游离苷元难溶于水,易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙酸乙酯等有机溶剂而黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂,难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂。

（5）黄酮类化合物多具有强的荧光,在紫外灯照射下呈亮黄、黄绿、亮蓝、暗棕等颜色。

（6）黄酮类化合物对盐酸镁粉或汞齐呈鲜红、紫色或黄色反应。结构中带有3一OH,5一OH或邻位羟基者,均能与金属盐类试剂如铝盐、镁盐、腮盐、铁盐等形成颜色较深的络合物。

【药理作用】

1.抗氧化 黄酮类化合物具有较强的抗氧化作用,其作用机制主要如下①对体内酶的作用。体内许多氧化酶与自由基生成有关,黄酮类化合物通过特异性的选择与氧化酶结合,影响酶的构型、构象,从而抑制酶的活性。②对金属离子的作用。黄酮属于多酚羟基化合物,相邻的羟基或羰基上的氧原子作为配位原子同金属离子配合形成五元或六元配合物,从而清除引发活性自由基产生的链反应中的催化剂。③影响自由基链反应。黄酮类化合物通过酚羟基与自由基反应生成较稳定的半醒式自由基,从而终止自由基链反应。

2.抗菌与抗病毒 黄酮类化合物具有抗菌,抗病毒作用。它们的抗毒活性与其非糖苷复合物结构和C一3的羟基化作用密切相关。黄酮类化合物可以抑制人合胞体病毒和HIV等病毒。

3.抗癌与抗肿瘤 黄酮类化合物具有抗癌,抗肿瘤作用,主要通过抑制细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制癌基因表达等达到抗肿瘤的目的。柑橘类黄酮可以抑制鳞状癌细胞,胶质肉瘤,恶性黑素瘤细胞的扩散,柑橘类黄酮可以阻止苯并花和黄曲毒霉素在上的复制。

4.抗炎,调节免疫活性 组织发炎主要是由组胺的释放引起的反应,该过程通常伴随着蛋白激酶C（PKC）、酪氨酸激酶（TPK）、磷酸酯酶Az等酶类的激活,类黄酮的存在可以抑制细胞中这些酶的活性,从而阻碍组胺的释放,起到抗炎症的作用。黄酮类化合物对苏氨酸一丝氨酸蛋白激酶和酪氨酸蛋白激酶的具有明显的选择性。

5.治疗心血管疾病 黄酮类化合物具有钙拮抗作用,通过影响花生四烯酸的代谢过程,从而抑制血小板聚集。大量临床研究认为,黄酮类化合物具有抗血栓功效,其通过增强肉皮细胞的功能,从而达到有效地治疗高血压和预防心脏疾病的功效。

6.解毒护肝 黄酮类化合物具有解毒护肝的功效。研究者认为,其护肝机理可能与黄酮类化合物的膜稳定作用有关,它可以有效地抑制机体内的脂质过氧化反应而起到护肝解毒的作用。

7.影响内分泌和代谢 黄酮类化合物可以和激素一运输蛋白相互作用而抑制某些相关酶的活性,从而改变组织中某些激素的浓度。

8.对维生素C的保护 黄酮类化合物可以作为维生素C的抗氧化剂。黄酮类化合物对维生素C的保护作用与其结构基团密切相关。

【提取方法】

1.水提法 水提法仅限于提取黄酮营类物质,在提取过程中主要考虑加水量、提取温度、提取时间及提取次数等因素。例如在金银花叶总黄酮的水提取工艺研究中选用水浴温度、溶剂量、提取次数、提取时间四因素进行了正交试验,结果表明16倍量水,90℃水浴回流,提取4次,每次1h为工艺。此工艺成本低、安全,适合工业化大生产,但由于水的极性大,易把蛋白质、糖类等溶于水的成分浸提出来,从而使提取液存放时,易腐败变质,为后续的分离带来困难,但如果直接用提取液作原料生产制剂或饮料等,因消耗溶剂的费用比其他方法低,仍为一种可取的提取方法。

2.碱性水或碱性稀醇提取法 黄酮类化合物大多具有酚羟基,因此,可以用碱性水或碱性稀醇浸出,经酸化后得出黄酮类化合物。主要用的碱性溶液是稀氢氧化钠和石灰水氢氧化钙水溶液。氢氧化钠水溶液的浸出能力高,但杂质较多不利于纯化。石灰水可以使一些鞣质或水溶性杂质沉淀生成钙盐沉淀,有利于浸液纯化,但是浸出效果不如氢氧化钠水溶液效果好,同时有些黄酮类化合物能与钙结合成不溶性物质,不被溶出。一般可以根据不同的原料使用不同的碱性溶液。

3.有机溶剂提取法 这是国内外使用最广泛的方法。有机溶剂主要用乙醇、甲醇、乙酸乙酷、乙醚等。本法主要用于提取脂溶性基团占优势的黄酮类物质,对设备要求简单,产品得率高,但成本较高,杂质含量也较高。常见的可以分为三种方法冷浸法、渗流法、回流法。冷浸法不需加热,但费时较长,效率低渗辘法由于保持一定的浓度差,所以提取效率较高,浸液杂质较少,但费时较长,溶剂用量大,操作麻烦回流法效率较冷浸法和渗辘法高,速度快,但含受热易破坏的原料,不宜用此法。根据不同原料特点采用不同方法。

4.酶法提取工艺 酶法提取工艺是在传统提取方法的基础上,根据植物药材细胞壁的构成,利用酶反应所具有的高度专一性等特点,选择相应的酶,将细胞壁的组成成分溶解或降解,破坏细胞壁的结构,使有效成分充分暴露出来,溶解、混悬或胶溶于溶剂中,从而达到提取细胞内有效成分的目的。

【主要参考资料】

[1]申严. 枳实黄酮类成分的研究与开发[D].首都师范大学,2004.

[2]黄爱华. 枳实中黄酮提取与纯化工艺研究[D].广州中医药大学,2008.

[3]刘艳. 枳实中黄酮类物质提取及吸附分离新探索[D].湖南师范大学,2011.

[4]王巧能. 枳实中黄酮类化合物的提取、分离、鉴定与生物活性研究[D].浙江工商大学,2008.