刺五加皂苷E的主要应用

背景及概述^[1]

刺五加提取物具有一定的抑制巨噬细胞活化的作用。刺五加皂苷B和刺五加皂苷E是刺五加中重要的有效单体成分，但是目前对该两种单体成分抑制巨噬细胞活化作用的研究还未见文献报道。

应用^[1]

1. 通过体外培养的巨噬细胞研究刺五加皂苷B和皂苷E对巨噬细胞活化的抑制作用。结果表明

3.1刺五加皂苷B和皂苷E对巨噬细胞增殖的影响：加入不同浓度的刺五加皂苷B和皂苷E后，巨噬细胞的刺激增殖指数（SI）均接近1.0，各浓度之间无明显差异（P＞0.05），说明细胞没有出现明显增殖或死亡现象，刺五加皂苷B和皂苷E对巨噬细胞没有毒性作用，也没有促进细胞增殖的作用。

2）刺五加皂苷B和皂苷E对巨噬细胞分泌细胞因子功能的影响结果见图。刺五加皂苷B和皂苷E在浓度20μmol/L时即可明显抑制TNF-α和IL-6的分泌，且这种抑制作用随着刺五加皂苷浓度的提高而增强，呈现明显的剂量依赖性，当浓度达到160μmol/L时抑制效果最显著。其他4种细胞因子（IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ）含量实验组和对照组无明显差异，均低于检测下限。

3）刺五加皂苷B和皂苷E抑制TNF-α的时间曲线见图。刺五加皂苷B和皂苷E加入后2h即显示出明显的抑制巨噬细胞分泌TNF-α作用，随着时间延长抑制作用逐渐增强，作用48h后抑制率可达99%以上。

2.采用皮下注射牛II型胶原蛋白(CII)的方法评价不同剂量组刺五加皂苷E(EE)对类风湿关节炎模型小鼠的治疗效果。

结果：

①用牛II型胶原蛋白免疫DBA/1小鼠诱导类风湿性关节炎的方法可靠，发病时间齐，发病率高。

②与CIA模型组比较，30mg/kg和60mg/kg刺五加皂苷E治疗组小鼠关节炎评分降低，体重减轻的程度减少，后爪肿胀程度也明显减轻(P<0.01)；15mg/kg刺五加皂苷E治疗组的小鼠关节炎评分和体重减轻的程度以及后爪肿胀度也降低，但统计学差异不显著(P>0.05)。

③钼靶X线光片和micro-CT检查发现：CIA模型组小鼠关节结构破坏，关节间隙消失，骨质表面粗糙；刺五加皂苷E(30mg/kg和60mg/kg)治疗组中小鼠的骨质破坏程度均明显降低，小鼠骨质破坏程度的计分也明显降低(P<0.01)，而刺五加皂苷E(15mg/kg)治疗组并没有表现出明显的改善(P>0.05)。

④HE染色结果显示：CIA模型组小鼠滑膜中有明显的炎细胞浸润、血管翳形成、软骨破坏和骨侵蚀；刺五加皂苷E(30mg/kg和60mg/kg)治疗组小鼠滑膜中炎细胞浸润程度减轻，血管翳数量明显降低，软骨破坏及骨侵蚀的程度也明显的被抑制，而刺五加皂苷E(15mg/kg)治疗组变化并不明显。

⑤抗II型胶原抗体水平结果显示：CIA模型组小鼠血清中抗II型胶原抗体水平很高；刺五加皂苷E(30mg/kg和60mg/kg)治疗组小鼠血清中抗II型胶原抗体水平明显降低(P<0.01)；刺五加皂苷E(15mg/kg)治疗组小鼠血清中抗II型胶原抗体水平也明显降低，差异有统计学意义(P<0.001)。

⑥细胞因子水平结果显示：刺五加皂苷E治疗组小鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-23的水平较CIA模型组明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。IL-17水平虽有所降低，但差异没有统计学意义。

⑦体外实验结果表明：刺五加皂苷E对巨噬细胞无毒副作用，并能抑制巨噬细胞的活化，使炎性细胞因子TNF-α和IL-6的分泌减少，且呈时间和剂量的依赖性，与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：

①牛II型胶原免疫DBA/1小鼠可建立稳定的类风湿性关节炎模型。

②刺五加皂苷E能够明显地改善CIA小鼠关节炎的症状。

③刺五加皂苷E可抑制TNF-α、IL-6和IL-23等炎性细胞因子的产生。

主要参考资料

[1] 刺五加皂苷B和皂苷E抑制巨噬细胞活化作用的实验研究

[2] 类风湿性关节炎小鼠模型的制备及刺五加皂苷E对其治疗作用的研究