细辛脂素的主要作用

背景及概述^[1-2]

细辛为马兜铃科植物北细辛AsarumheterotropoidesFr.Schmidtvar.Mandshu ricum(Maxim.)Kitag、汉城细辛AsarumsieboldiiMiq.var.seoulenseNakai或华细辛AsarumsieboldiiMiq.的干燥全草，前二种习称“辽细辛”。水细辛主产于辽宁、吉林、黑龙江；华细辛主产于陕西。细辛具有祛风散寒、通窍止痛、温肺化饮的功效。用于风寒感冒、头痛、牙痛、鼻塞鼻渊、风湿痹痛、痰饮喘咳。细辛为常用中草药，在《神农本草经》中被列为上品，具有温经散寒、化饮、祛风止痛的功用。细辛脂素为细辛的主要有效成分，有抗病毒和抗结核杆菌作用，临床观察对气管炎具有一定疗效；近几年对细辛药理作用研究，发现细辛脂素还有抗免疫样作用。

作用^[3-5]

1）细辛脂素体外免疫抑制作用。提取中药细辛中的细辛脂素，分离成年Wistar大鼠的心肌细胞(2×106个/ml)和SD大鼠的脾细胞(1×107个/ml)，前者做刺激细胞，后者做反应细胞，各0.1ml于96孔板进行混合细胞培养，加入0.1ml含细辛脂素大鼠血清，培养108h后MTT法测定脾细胞增殖抑制率；培养液上清中IL-2、IFN-γ及IL-4水平；并用光镜、电镜观察心肌细胞。结果含细辛脂素的动物血清可在体外抑制脾细胞增殖反应(抑制率达60.37%)，心肌细胞损伤减轻，使培养液上清中IL-2和IFN-γ浓度[(69.11±17.47)pg/ml；(183.11±95.24)pg/ml]与阳性对照组相比降低[(160.44±19.79)pg/ml；(521.89±133.18)pg/ml]，IL-4浓度[(53.14±11.80)pg/ml]与阳性对照组相比[(14.44±4.21)pg/ml]升高。与CsA组相比各指标相似[IL-2：(53.11±18.35)pg/ml；IFN-γ：(166.22±61.56)pg/ml；IL-4：(44.20±11.56)pg/ml]，P>0.05。结论　中药细辛提取物细辛脂素与CsA有相似的免疫抑制作用，并能够产生保护受体器官作用；细辛提取物体外抗排斥反应时IL-2和IFN-γ降低的同时使IL-4升高可能与提高移植耐受有关。

2）细辛脂素抗心脏移植急性排斥反应的作用及对黏附分子表达的影响。提取细辛中的细辛脂素，健康雄性Wistar大鼠(供体)和SD大鼠(受体)各64只，建立大鼠异位心脏移植模型，将接受心脏移植的SD大鼠分成4组：阳性对照组，不给任何处置；环孢霉素A(CsA)组，术前1d开始灌服CsA；细辛脂素组，术前1d开始灌服细辛脂素；混合药物组，术前1d开始灌服半量CsA和半量细辛脂素。每组各8只，术后第7天处死，另外8只用于观察移植物生存天数。移植心常规石蜡包埋、切片，显微镜观察并进行组织病理分级；免疫组化染色法检测移植物局部细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)含量。结果：移植心存活时间，CsA组、细辛脂素组和混合药物组均较阳性对照组显著延长(P<0.01)。与阳性对照组比较，细辛脂素可减轻心肌病理形态学的损伤。CsA组、细辛脂素组和混合药物组移植心局部ICAM-1和VCAM-1含量较阳性对照组明显减少。结论：细辛脂素可延长移植物存活时间并减轻病理形态的损伤，与CsA有相似的免疫抑制作用。ICAM-1和VCAM-1在发生排斥反应时表达增加，细辛脂素可抑制二者的表达。

3）细辛脂素对柠檬酸诱导豚鼠咳嗽次数的影响：各组动物经过柠檬酸雾化激发后6min内的咳嗽次数及咳嗽抑制率与空白组相比，细辛脂素低、中、高剂量组均可以降低豚鼠的咳嗽次数，均具有显著性差异(低剂量组p<0.05；中、高剂量组p<0.01)，镇咳率分别达到39.2％、50.7％和53.0％，其中细辛脂素高剂量组(120mg/kg)镇咳效果接近磷酸可待因(30mg/kg)的水平；与细辛SFE-CO2挥发油相比，细辛脂素中、高剂量组均表现出更好的镇咳效果(细辛SFE-CO2挥发油镇咳率38.4％)，但组间均无显著性差异。以上结果表明，细辛脂素具有良好的镇咳作用，并具量效关系。

制备^[5]

方法1：细辛脂素的制备：采用超临界CO2萃取装置萃取细辛总挥发油提取物，将细辛的根与/或根茎洗净、晾干、粉碎机粉碎，得细辛粗粉，将细辛粗粉加入萃取釜的装料瓶中，再装入萃取釜，密封；对萃取釜、分离釜分别进行加热，当萃取釜温度达到50℃、分离釜分离温度40℃时，打开萃取釜阀门，当萃取釜内压力同贮罐压力相等时打开排气阀排净空气，通过高压泵对系统进行加压，当萃取釜达到设定压力35Mpa、分离釜Ⅰ、分离釜Ⅱ分别达到设定压力5Mpa时，控制CO2流量40L/h，开始循环萃取；保持萃取温度50℃、分离釜分离温度40℃、萃取时间180min，得细辛总挥发油，得率为2.5％(mL/g)；将细辛总挥发油-5℃静置24h，减压抽滤，得细辛脂素粗品；取细辛脂素粗品加入与细辛脂素粗品同样体积的无水乙醇溶解，置于-20～4℃低温重结晶2次，待白色针状结晶析出，即得细辛脂素纯品，得率为1.5％(g/mL)。

方法2：

主要参考资料

[1] 来源：中药化学成分提取分离手册

[2] 从细辛中分离细辛脂素工艺研究

[3] 细辛脂素体外免疫抑制作用的实验研究

[4] 细辛脂素抗心脏移植急性排斥反应的作用及对黏附分子表达的影响

[5] CN201410606528.3超临界二氧化碳萃取法提取高纯度细辛脂素的方法及用途