白葡萄球菌粉的应用与制备

概述^[1]

白葡萄球菌粉为一种非致病性的口服细菌制剂，系由非致病性白葡萄球菌液体培养而得的灭活干燥菌体制成。实验表明，其具有近似可待因的镇咳强度，直接作用于延脑咳嗽中枢，对急性咳嗽镇咳作用明显，剂量越大，镇咳作用越强，并有调节自主神经系统功能，能使痰量明显减少。

应用^[2]

白葡萄球菌粉为一种非致病性的口服细菌制剂，系由非致病性白葡萄球菌液体培养而得的灭活干燥菌体制成。实验表明，其具有近似可待因的镇咳强度，直接作用于延脑咳嗽中枢，对急性咳嗽镇咳作用明显，剂量越大，镇咳作用越强，并有调节自主神经系统功能，能使痰量明显减少。

制备^[1,3]

方法1：白葡萄球菌粉按照如下工艺制备而得：

1）取白葡萄球菌液（5×107CFU/mL），按照3%的接种量接种到种子培养基中，30℃、100rpm摇床培养18h，获得种子液；所述种子培养基的组分为：葡萄糖12g/L，琼脂7g/L，蛋白胨3g/L，KH₂PO₄0.5g/L，K₂HPO₄0.5g/L，MgSO₄0.1g/L，FeSO₄0.1g/L，pH7.5；

2）将种子液按照5%的接种量接种于装有50L麦麸培养基的发酵罐中进行发酵培养，培养温度30℃，通气量保持溶氧水平为20％，并通过添加葡萄糖控制含糖量不低于0.2wt%，发酵培养54h，得白葡萄球菌发酵液。

3）往白葡萄球菌发酵液中添加甲醛，控制终浓度为0.5wt%，25℃灭活48h，再通过高速碟片机以5000rpm的速度离心8min，收集菌体沉淀，真空冷冻干燥，即得。

方法2：一种白葡萄球菌粉的制备工艺，其包括如下步骤：

1）取白葡萄球菌液（3×107CFU/mL），按照5%的接种量接种到种子培养基中，30℃、150r/min摇床培养24h，获得种子液；所述种子培养基的组分为：葡萄糖10g/L，琼脂5g/L，蛋白胨3g/L，KH₂PO₄0.5g/L，K₂HPO₄0.5g/L，MgSO₄0.1g/L，FeSO₄0.1g/L，pH7.5；

2）将种子液按照6%的接种量接种于装有10L发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养，培养温度30℃，通气量保持溶氧水平为20％，并通过添加葡萄糖控制糖含量不低于0.2wt%，发酵培养48h，得发酵液；所述发酵培养基按照如下工艺制备而得：（1）将麦麸研磨粉碎，过100目筛，然后以1：20的料水质量比混合，再加入中性淀粉酶，添加量为0.5U/g麦麸，在65℃温度条件下处理15min，然后离心，收集沉淀和上层液体，将上层液体置于95℃的条件下，保温10min灭酶，冷却至室温，得到组分A；（2）将沉淀加入到5倍重量的浓度为3M的盐酸，在80℃搅拌水解9小时，搅拌速度为100rpm，过滤收集滤液，然后用氨水中和残余盐酸，调整溶液pH为7.5，得到组分B；（3）将组分A和组分B混匀得到发酵培养基；

3）往发酵液中添加甲醛，控制终浓度为0.5wt%，25℃灭活48h，再通过高速碟片机以4000rpm的速度离心10min，收集菌体沉淀，真空冷冻干燥，即得。

主要参考资料

[1] CN201810072108.X白葡萄球菌粉及其应用

[2]  CN201810072107.5白葡萄球菌粉的加工及质量检测方法

[3] CN201810119399.3一种白葡萄球菌粉的制备工艺