1, 6-二磷酸果糖钠

CAS号:217305-49-2
英文名:FLUORESCEIN DIPHOSPHATE, TETRAAMMONIUM SALT
中文名:1, 6-二磷酸果糖钠
CBNumber:CB7416934
分子式:C20H17NO11P2
分子量:509.3
MOL File:217305-49-2.mol

1, 6-二磷酸果糖钠化学性质

储存条件 :-20°C
形态 :lyophilized

1, 6-二磷酸果糖钠性质、用途与生产工艺

化学性质 1，6-二磷酸果糖钠为白色或类白色的结晶性粉末，易流动，极易吸湿。易溶于水，不溶于乙醇等有机溶剂。微香，味微咸，干燥品在室温下稳定。
1，6-二磷酸果糖是存在于人机体内葡萄糖代谢过程中的重要中间产物，是分子水平上的代谢调节剂。它的三钠盐即本品能通过调节葡萄糖代谢中若干酶的活性，提高细胞内三磷酸腺苷和磷酸肌酸的浓度，促进钾离子内流，增加红细胞内二磷酸甘油酸的含量，抑制氧自由基和组织胺的释放，能够减轻组织因缺血、缺氧造成的组织损害，尤其是对缺血心肌显示出良好的保护作用。静脉注射，血浆中半衰期为10-15min。它自血液分布到血循环以外的组织，经磷酸酶水解成磷酸与果糖，极少部分自尿排出。
用途适用于心肌缺血的辅助治疗。
注意事项：对本品过敏者、高磷酸盐血症及肾功能不全者禁用。
生产方法方法一、酶转化法
酶液制备取经多代发酵应用过的酵母渣；悬浮与适量的蒸馏水中，-20℃反复冻融3次即得酶液。
酵母渣(含FDP合成酶)[-20℃]→酶液
转化、除杂蛋白上述酶液中加入底物(8%得蔗糖，4%NaH2PO4，0.29%MgCl2，pH6.5)于30℃反应6h，再煮沸5min，离心除去杂蛋白即得转化清液。
酶液[底物]→[30℃, 6h]转化液[煮沸]→[30min]转化清液
吸附、洗脱转化清液通过DEAE-C阴离子交换柱层析，用蒸馏水洗涤至pH7.0，然后进行分离洗脱，收集洗脱液加入CaCl2生成其钙盐沉淀，过滤，得FDP钙盐。
转化清液[DEAE-C交换柱，水]→[pH7.0]洗脱液[CaCl2]→FDP钙盐
转化、成钠盐 FDP钙盐悬浮于水中，用732[H⁺]树脂将其转成 FDPH4，用2mol/L NaOH调pH至5.3-5.8成FDPNa3粗品。通过超滤、除菌、去热原、冻干即得FDPNa3精品。
FDP钙盐[732[H⁺]树脂]→FDPH4[2mol/L NaOH]→[pH5.3-5.8]FDPNa3粗品[过滤]→[除菌，支热原]超滤液→[冻干]FDPNa3精品
方法二、固定化细胞制备法
FDP产生菌的培养啤酒酵母接种于麦芽汁斜面培养基上26℃培养24h，转入种子培养基中，培养至对数生长期，转种于发酵培养基中，于28℃发酵培养24h，静置一周，离心，收集菌体。
FDP产生菌种子[培养基]→[26℃, 24h]FDP产生菌体
固定化细胞的制备取活化菌体用等体积生理盐水悬浮，预热至40℃，另用4倍量的生理盐水加热溶解卡拉胶(卡拉胶用量为3.2g/L)，两者于45℃混合搅拌10min，倒入成型器皿中，4-10℃冷却30min，加入等量的22.2g/L KCl液浸泡硬化4h，切成3mm×3mm×3mm小块即成。
FDP产生菌体[卡拉胶，KCl]→[4h]固定化细胞
固定化细胞的活化用含底物的表面活性剂，于35℃浸泡活化固定化细胞24h，以0.3mol/L KCl液洗涤后浸泡生理盐水中备用。
固定化细胞[0.3mol/L KCl, NaCl]→[35℃, 24h]活化固定化细胞
转化、除杂蛋白用活化固定化细胞充填柱反应器，以上行法，通入30℃底物溶液(内含8%蔗糖，4%NaH2PO4，0.3%ATP，0.29%MgCl2)收集转化液，除去杂蛋白得转化清液。
活化固定化细胞[底物]→[30℃]转化液[除杂蛋白]→转化清液
吸附、洗脱、成钙盐将转化清液通过已处理好的DEAE-C阴离子交换柱，洗涤，再洗脱，收集洗脱液加入适量的CaCl2，生成FDP钙盐沉淀。
转化清液[DEAE-C柱]→洗脱液[CaCl2]→FDP钙盐
转酸、成钠盐取FDP钙盐悬浮于无菌水中，用732[H⁺]树脂将其转成FDPH4，用2mol/L NaOH调pH至5.3-5.8成钠盐，活性炭脱色，超滤，冻干，得FDPNa3精品。
FDP钙盐[732[H⁺]树脂]→FDPH4[2mol/L NaOH]→[pH5.3-5.8]FDPNa3[超滤]→超滤液[冻干]→FDPNa3精品。