过氧化物酶（辣根）

乳过氧化物酶存在于哺乳动物的乳腺、唾液和泪液腺体及其各自的分泌物，即牛奶、唾液和眼泪。它是牛乳和人乳中常见的成分之一，并且存在于迄今为止已经检测过的所有哺乳动物乳中。乳过氧化物酶是发现的首个分泌型过氧化物酶，且在保护哺乳期妇女的乳腺以及新生儿肠道免受病原微生物侵害方面起重要作用，是机体防御体系的一部分。乳腺、唾液和泪腺中的过氧化物酶在化学和免疫学上性质相似。

1.过氧化物酶（辣根）是目前在ELISA中应用最为广泛的标记用酶之一，主要是因为其容易制得，价格相对较低，且性质稳定，耐热和有机溶剂，与抗原或抗体偶联后，活性损失很小。
2. 它也常用与污水处理。工业废水中含有大量的苯酚，双酚A等分类和芳香胺类化合物，等环境污染较大，它可以将这些污染物作为底物，氧化成自由基，自由基在聚集成沉淀聚合物，从而大大降低对环境的污染。
3. 它近几年来被研究用作食品添加剂。由于其本身无毒无害，反应条件温度，反应易控制，近年来被研究用于食品的保鲜，解毒和检测等领域。
4. 检测领域：可以与葡萄糖氧化酶联用，用以检测葡萄糖含量。

（1）将辣根破碎、浸提、离心得到辣根过氧化物酶粗提液；

（2）将辣根过氧化物酶粗提液用截留分子量为70kDa‑100kDa的超滤膜进行超滤分离，得到辣根过氧化物酶超滤液；

（3）将辣根过氧化物酶超滤液用截留分子量为1‑30kDa的超滤膜进行超滤浓缩，得到辣根过氧化物酶浓缩液；

（4）将辣根过氧化物酶浓缩液脱水得到辣根过氧化物酶。

一种猪肉中过氧化物酶的快速定量检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括以下步骤：

(1)配制一系列以辣根过氧化物酶为标准酶的标准酶溶液；

(2)以过氧化脲为反应底物，以3,3’,5,5’-四甲基联苯胺为显色剂，以磷酸 二氢钠缓冲液为缓冲液，分别测试步骤(1)中所配制的标准酶溶液，测试的反 应温度为20-30℃，反应pH值为4.0-5.0，反应时间为30-90s，反应结束后加入 稀硫酸溶液，终止反应，获得反应产物溶液；

(3)将各反应产物溶液置于紫外分光光度计中，在450nm的吸收波长下分 别测定其OD值，获得辣根过氧化物酶浓度-OD值的标准曲线；

(4)测试待测猪肉中过氧化物酶反应后其反应产物溶液的OD值，根据标 准曲线计算出猪肉中过氧化物酶的浓度。