应用 小鼠小肠上皮细胞的分离 小鼠小肠上皮细胞的纯化

小鼠小肠上皮细胞

小鼠小肠上皮细胞,,结构式
小鼠小肠上皮细胞
  • CAS号:
  • 英文名:Mouse Intestine: Normal Intestinal Mucosa Epithelial Cells
  • 中文名:小鼠小肠上皮细胞
  • CBNumber:CB64815491
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

小鼠小肠上皮细胞性质、用途与生产工艺

  • 应用 小肠上皮细胞(intestineepitheliumcells,小肠上皮细胞)是吸收营养物质的专职细胞,小肠上皮细胞的体外培养对于研究肠道微生态营养,细胞间的信号转导以及隐窝-绒毛系统中各种细胞增殖和分化机制等方面具有重要意义。
  • 小鼠小肠上皮细胞的分离 无菌条件下用含抗生素的PBS(或无血清DMEM)清洗小肠数次,清洗液中的抗生素为培养液中的2~3倍。将肠管剪成小于1mm3的碎片,再转移至50mL的离心管中,加无血清DMEM清洗,用移液管反复吹打,4℃,1000r离心3min。如上反复清洗组织块,直至上清液澄清。用5%FBS-DMEM悬浮组织块并取适量种植于培养皿或培养瓶中。培养数天后换液,继续培养。
  • 小鼠小肠上皮细胞的纯化 (1)刮除法:将培养瓶放在光学显微镜下观察,用标记笔勾画出上皮细胞集落。在超净台上,用橡胶或玻璃刮子(可用灭过菌的枪头)将成纤维细胞区域刮除。用PBS洗涤培养物,洗去刮下来的细胞。再用胰蛋白酶消化上皮细胞,并用新鲜的培养液重新悬浮,转移至新的培养瓶继续培养。经常观察培养物,必要时,可以重复上述的刮除处理过程,直至显微镜下观察时,视野中大部分为上皮细胞。
    (2)相差消化和相差贴壁法:用PBS洗涤细胞,加入0.05%的胰蛋白酶-EDTA消化1~2min,轻轻拍打培养瓶,再将消化液吸去。再加入0.05%的上述酶溶液37℃消化2~3min,加入5%FBS-DMEM吹打,再将细胞悬液移入新的培养瓶(或培养板)继续培养。
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