描述 培养步骤

AML12

AML12,,结构式
AML12
  • CAS号:
  • 英文名:AML12
  • 中文名:AML12
  • CBNumber:CB34819377
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

AML12性质、用途与生产工艺

  • 描述

    通过电子显微镜,小鼠肝细胞表现出典型的肝细胞特征,例如过氧化物酶体和胆小管样结构。AML12细胞保留表达血清(白蛋白,α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白)和间隙连接(连接蛋白26和32)蛋白的高水平mRNA的能力,并且仅包含乳酸脱氢酶的同工酶5。细胞表达高水平的人TGFα和较低水平的小鼠TGFα。肝特异性蛋白的表达随培养时间的延长而降低,但会通过在无血清培养基中生长细胞而重新激活。

    AML12

  • 培养步骤

    1.断头处死成年小鼠,充分放血后迅速无菌取出肝脏组织,置于缓冲液中;

    2.首先将肝组织剪成5mm边长的组织块,使用缓冲液洗涤2-3遍,然后进一步将肝组织剪碎成1mm3的组织小块,使用缓冲液冲洗直至上清澄清;

    3.组织块转移至50ml离心管内,加入10ml消化液,37%,静置消化1h,间隔15min摇动1次;

    4.消化完全后使用巴氏滴管反复吹打消化产物30次,消化物分别过80目、200目细胞筛,收集滤液;

    5.1000rpm,室温离心8min,收集细胞,使用基础培养基重悬细胞;

    6.600rpm,离心5min,重复离心纯化2次,细胞经台盼蓝染色,计数,按1x106/25cm2的细胞数分瓶,使用完全培养基+20%FBS进行培养。

    7.18h后换液,以后每天换液。

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