RF/6A 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
- CAS号:
- 英文名:RF/6A
- 中文名:RF/6A 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系
- CBNumber:CB26199649
- 分子式:
- 分子量:0
- MOL File:Mol file
RF/6A 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系性质、用途与生产工艺
- 细胞特点 RF/6A细胞在早期自发转化并已传代540次以上,电镜下观察到Weibel-Palade颗粒。高代次的RF/6A细胞用作滋养层以增强贴壁、转接能力和供养眼色素层黑素细胞。EXPASY细胞库显示,细胞属性可能被误认,虽然最初被认为是一种内皮细胞系,但已证明缺乏这种细胞类型的功能和转录组学特征。
- 细胞复苏 冻存RF6A猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系细胞的复苏:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
-
细胞传代
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
RF6A猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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