钙泊三醇

钙泊三醇英文名Calcipotriol或Calcipotriene，是由丹麦Leo公司1987年开发成功，其软膏剂于1996年获美国FDA批准上市，商品名达力士(Dovonex)，规格0.75mg/15g，是治疗银屑病的一线用药。

钙泊三醇具有以下药理作用：①调节表皮角质形成细胞异常增殖，促进其正常分化并可增加角质层内细胞交联的酶活性；②调节T淋巴细胞成熟、分化及相关炎性细胞因子的表达，减少表皮内活化T淋巴细胞的数量；③维护皮肤屏障作用。

酸性、碱性、双氧水的破坏对钙泊三醇有很大的影响，钙泊三醇色谱峰几乎完全消失；光照破坏对钙泊三醇有一定影响，钙泊三醇峰面积降低一半。由于钙泊三醇对光、热、酸、碱都比较敏感，在溶液中较容易转化为可逆的异构体，且与时间和温度有关。故本方法中明确了供试品溶液与对照品溶液应在临用前制备，且整个分析过程应快速并注意避光操作的要求。同时，钙泊三醇原料及其制剂生产和贮存过程中，应尽量避免光、热、酸、碱以及氧化对产品质量的影响。

中间体3是原料2经二氧化硫Diels-Alder加成保护共轭三烯制得。在手性助剂(1S,2R)-(-)-顺-1-氨基-2-茚满醇(4)存在下，N,N-二乙基苯胺-硼烷(DEANB)立体选择性还原(5E,7E,22E)-24-环丙基 -1a,3B-双(叔丁基二甲基硅氧基)-9,10-开环胆甾-5,7,10(19),22-四烯-24-酮二氧化硫加成物(3)的24位酮羰基，脱二氧化硫保护后，经色谱分离得到所需24位S构型产物5(收率58%)，6的收率14%。再采用氟化四正丁铵(TBAF)脱硅烷保护基，制得(5E,7E,22E,24S)-24-环丙基-9,10-开环胆甾-5,7,10(19),22-四烯-1a,31,24-三醇(7)。7在正庚烷中几乎不溶解，于是以正庚烷对粗品打浆，除去溶于正庚烷的5和脱硅烷基不完全的杂质，革除色谱纯化；然后7在三线态光敏剂9-乙酰蒽醌(9-AA)存在下，进行光异构化反应；最后经纯化制得1钙泊三醇，HPLC纯度99.35%，两步收率提高到75%。

1、色谱条件

Kromasil 100-5 C18色谱柱，乙腈-甲醇-0.01mol/L磷酸盐缓冲液(取适量的0.01mol/L的磷酸氢二铵缓冲液，用磷酸调节pH值至6.0)(20:50:30)为流动相，UV检测器，检测波长为264nm，柱温为35℃，流速为1.0m/min，精密量取20uL注入液相色谱仪，记录色谱图。

2、溶液的制备

供试品溶液的制备：取原料样品约50mg，精密称定，置50mL量瓶中，加入流动相溶解，摇匀，流动相定容至刻度。精密量取5mL置50mL量瓶中，流动相定容至刻度。用0.4 um微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。

系统适用性溶液的制备：精密称取钙泊三醇、5,6-反式钙泊三醇和24-表钙泊三醇对照品适量，置同一量瓶中，加流动相溶解并稀释制成每1mL中分别约含10ug的溶液。

对照溶液的制备：精密量取供试品溶液1.0mL，,置100mL量瓶中，加流动相稀释至刻度。