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灭幼脲类杀虫剂不同于一般杀虫剂，它的作用位点多，目前报道的作用机制主要有下面几种:①抑制昆虫表皮形成。这是研究最多和最深入的作用机制。灭幼脲属于昆虫表皮几丁质合成抑制剂，属于昆虫生长调节剂的范畴。主要通过抑制昆虫的蜕皮而杀死昆虫，对大多数需经蜕皮的昆虫均有效。主要表现属胃毒作用，兼有一定的触杀作用，无内吸性。最近的生化试验证实灭幼脲能刺激细胞内cAMP蛋白激活酶活性，抑制钙离子的吸收，影响胞内囊泡的离子梯度，促使某种蛋白酶磷化，从而抑制蜕皮激素和几丁质的合成。其作用特点是只对蜕皮过程的虫态起作用，幼虫接触后，并不立即死亡，表现出拒食、身体缩小，待发育到蜕皮阶段才致死，一般需经过2d后开始死亡，3~4d达到死亡高峰。成虫接触药液后，产卵减少，或不产卵，或所产卵不能孵化。残效期长达15~20d。②导致成虫不育。通过饲毒和局部点滴方法，用灭幼脲处理雌成虫，发现灭幼脲影响许多昆虫的繁殖能力，使其不能产卵或产卵量少。对雌成虫无影响或影响较小。在灭幼脲处理的棉象甲雌成虫体内，发现 DNA合成明显受到抑制，RNA及蛋白质的合成未受影响。③干扰体内激素平衡。昆虫变态是在保幼激素和蜕皮激素的合理调控下完成的。用灭幼脲处理黏虫和小地老虎，均发现灭幼脲使虫体内保幼激素含量增高，蜕皮激素水平下降，导致昆虫不能蜕皮变态。④抑制卵孵化。⑤影响多种酶系影响中肠蛋白酶的活力。此外还发现灭幼脲对环核苷酸酶、谷氨酸-丙酮酸转化酶、淀粉酶、酚氧化酶等有抑制作用，所有这些均可导致害虫发育失常。