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ASMI是一种比率型双光子荧光探针，能够快速响应性地选择性检测和监测线粒体Cys，并在150μm的深度下对活细胞和完整组织进行高对比度和亮度的成像。ASMI由高度双光子活性的生物相容性merocyanine荧光素和丙烯酸基团作为硫醇反应位点组成。由于其容易调节的细胞器靶向性和较大的双光子吸收性质，已广泛探索将其作为荧光传感或成像探针。一些丙烯酸功能化的探针倾向于更活跃地与Cys反应而非Hcy和GSH。反应机制涉及Cys与丙烯酸的共轭加成，生成硫醚，然后通过分子内环化生成merocyanine荧光素和环状酰胺（方案1）。重要的是，生物相容且光稳定的ASMI和merocyanine显示出非常大的双光子作用截面（Φσmax），分别为65.2 GM（λex = 740 nm）和72.6 GM（λex = 760 nm），这使其在高对比度和亮度的比率型双光子激发生物成像应用中具有巨大的潜力。ASMI是活细胞和深度组织应用中展示高度选择性检测和成像线粒体Cys的双光子激发模式的比率型荧光探针。