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用于含量测定/鉴定/药理实验等

荔枝草又名雪见草、水羊过冬、癞蛤蟆草等，为唇形科鼠尾草属植物荔枝草（salviaplebeia RBrown） 的全草，全草可入药，主要产自江浙等地资源丰富。其最早出自于《本草纲目》，性凉，味苦、辛，具有利尿消肿、清热解毒、凉血、止血等功效。用于治疗支气管炎、扁桃体炎、腹腔积液肿胀、咯血、便血等。其复方制剂在临床上用于治疗咳嗽﹑咽炎等病症，效果十分显著。现代研究表明，其主要药效成分为黄酮类化合物，包括高车前苷及其苷元、β胡萝卜苷、齐墩果酸、半齿泽兰素等。药理研究表明荔枝草黄酮类化合物具有抗氧化、抗肝损、抑菌、祛痰及抗组胺、止咳平喘等作用。
高车前苷属黄酮类化合物，主要存在于荔枝草中，药理研究表明其具有治疗肝损伤，改善内皮胰岛素耐受性和抑制肿瘤生长等作用。高车前素为高车前苷的苷元形式，具有抗骨质疏松，诱使癌细胞凋亡及用于治疗哮喘。另有实验表明，高车前苷具有降血糖，调血脂作用，能明显改善NO的生成，并能改善游离脂肪酸所致的血管内皮胰岛素抵抗，可能通过抑制活性氧的生成而保护血管内皮细胞，其作用机制与抗氧化应激有关。高车前苷的保护血管内皮细胞作用，在防治糖尿病血管并发症具有良好的前景，但是其能否直接改善游离脂肪酸对血管内皮细胞的损伤尚不明确。

高车前苷，属于黄酮类化合物，易溶于甲醇、乙醇，微溶于丙酮，难溶于水。其半水合物为黄色结晶物。

本品有抑菌作用，体外对慢性气管炎常见的病原菌白色葡萄球菌、肺炎双球菌等有中等强度的抑制作用，对金黄色葡萄球菌在动物体内感染有一定的对抗作用，可降低死亡率20％。有一定的镇咳、祛痰效果，祛痰能力大于氯化铵，可用于治疗慢性气管炎，且毒性较小。

方法1：一种高车前苷的制备方法，包括以下步骤：
1）提取：将荔枝草原料粉碎，加入8～12倍量60-80％乙醇液加热回流提取2～3次，合并提取液，减压回收乙醇，得浓缩液；
2）柱分离：将上述浓缩液适量水稀释滤过，上大孔树脂柱，用乙醇水溶液梯度洗脱，薄层监测，收集高车前苷流分，浓缩洗脱液；
3）除杂：将上述浓缩液调节至酸性，滤出沉淀物，用丙酮洗涤，真空干燥得淡黄色粉末；
4）高速逆流色谱分离纯化：以乙酸乙酯-乙醇-水作为两相溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相，将上述粉末用下相溶解，流出物减压蒸干即得高车前苷产品。高速逆流色谱分离方法操作简便，同时也避免了样品的损失，与传统分离手段相比，克服了其操作繁琐，分离周期长的缺点，并具有制备量大，产品纯度高的优点。
方法2：采用荔枝草中提取高车前苷：
1）荔枝草中高车前苷的提取工艺：荔枝草饮片--粉碎--溶剂提取--过滤 减压浓缩--萃取--脱水--抽滤硅胶柱分离--纯化（重结晶）--抽滤--干燥。
2）提取条件：以60%乙醇为提取剂，浸提温度60℃，浸提时间2h，提取2次，料液比1g∶12mL的提取工艺条件下，荔枝草中高车前苷提取量为1．41g/kg 。红外光谱分析显示荔枝草提取物是高车前苷，纯度为98.2%，荔枝草提取物高车前苷对DPPH的EC50 =3．07mg/L，对DPPH的清除率可达到90%以上，具有较强的抗氧化活性。

高车前苷含量高效液相色谱法（HPLC）：
1）色谱条件为：HederaODS-2色谱柱（4.6mm×250mm，5 m），柱温30℃，甲醇-0.5%冰醋酸水溶液（1∶1）为流动相，流速1mL/min，检测波长335nm。以高车前苷对照品进样量对峰面积进行线性回归，得回归方程y=1023.1x-4.4056（r=0.9999）， 结果表明高车前苷在0.3～1.8 g范围内线性关系良好。
2）样品测定：分别取同体积对照品和样品按照上述方法测定，用标准曲线法计算含量。
3）结果：荔枝草中高车前苷保留时间为27.2min，高车前苷所占的峰面积比例为98.2%。

研究发现，通过灌胃高车前苷，最终从血液样品中检测到高车前苷和高车前素，并且高车前素的量约为高车前苷的5倍，说明高车前苷在肠道菌群作用下大部分水解生成高车前素，并且高车前素的吸收要远远好于高车前苷，但吸收后药效是否得到增强还不清楚，需要进一步探究。其大鼠给药后高车前苷的主要药动学参数如下：  

[1] 何银舟等. HPLC法测定荔之咽滴丸中高车前苷含量. 现代医药卫生.2014, 30(15):2252-2253.
[2] 吴松等. HPLC法同时测定大鼠血浆中高车前苷和高车前素的浓度.中药新药与临床药理.2015,26(2):211-213.
[3] 王辉等. 高车前苷改善棕榈酸所致的血管内皮细胞凋亡. 中药药理与临床2014;30( 3):39-42.
[4] 苏刘花.一种高车前苷的制备方法. 申请号201010520188.4. 申请日2010-10-26.
[5]孔庆新等. 荔枝草中高车前苷的提取与分析. 江苏农业科学. 2014,42(12):304-306.