α-淀粉酶都有哪些制备方法？

α-淀粉酶可以随机地从内部切断淀粉、糖原内的 α-1,4-葡萄糖苷键，将淀粉水解为糊精、低聚糖和单糖，其水解产物的末端残基碳原子的构型为 A 构型，所以称为 α-淀粉酶。

α-淀粉酶广泛应用于食品、酿造、制药和纺织等工业领域，其中用于淀粉转化领域的酶制剂占总酶制剂销售量的 10%~15%。

α-淀粉酶可以从植物、动物或微生物中分离提取得到。不同来源的 α-淀粉酶功能相似，但在应用条件上有所差异。

目前，α-淀粉酶基本都是通过微生物法进行商品化制备。制备商品化的 α-淀粉酶的微生物可以是细菌、真菌或基因工程菌等。

制备方法

中国专利 CN202080088339.5 公开了涉及麦芽五糖/麦芽六糖 α-淀粉酶的组合物和方法。

变体 α-淀粉酶可用于淀粉液化和糖化，用于清洁衣物、餐具洗涤，在动物饲料中用于改善消化率，以及用于烘焙和酿造等。

CN202111384720.9 涉及一种耐酸性高温 α-淀粉酶及其应用，该耐酸性高温α-淀粉酶具有 SEQ ID NO.4 所示的氨基酸序列，所述工程菌株以 CGMCC NO.20672 为宿主细胞，在缺失基因组原始 α-淀粉酶编码基因的基础上， 在基因组中整合表达本发明突变体基因， 最终得到的工程菌BYBG-8216 发酵产耐酸性高温 α-淀粉酶的发酵液酶活力282010U/mL，比出发菌株提高了 2 倍。所产的耐酸性高温 α-淀粉酶具有良好的耐高温性和耐酸性，可广泛应用在淀粉加工、啤酒酿造、发酵及纺织等行业。

CN202111281451.3 提供一种耐高温α-淀粉酶制备方法，包括以下步骤：

对菌种进行斜面活化，之后对活化后的菌种植入摇瓶种子培养基中进行培养；

将摇瓶种子培养基培养获得的菌种植入发酵罐进行多次发酵后获得麸曲；

对麸曲进行抽提，获得淀粉酶液和粗制品；

将淀粉酶液进行过滤并沉淀，获得淀粉酶制品。

CN202210715712.6 公开了一种利用麦芽四糖酶生产α-淀粉酶的方法，主要通过将地衣芽孢杆菌培养后，在发酵处理过程中每隔 2~4 h 流加 40％～70％的淀粉糖溶液、0.005%~0.010％的麦芽四糖酶， 发酵结束滤去发酵浆料中的残渣，即制得液体 α-淀粉酶。

该发明提供的麦芽四糖酶具有水解淀粉作用，在麦芽四糖酶作用下， 可以使玉米淀粉、 玉米粉水解生成麦芽四糖， 所制成的 α-淀粉酶活力比现有技术生产的分别提高了20%~30％，产品得率提高了 10％~20％。 

CN202210045722.3 公开了一种绿叶蔬菜食品加工用 α-淀粉酶制剂的高效纯化方法，主要包括有以下步骤：

将提取的地衣芽孢杆菌以及 HY-3 菌株接种到种子培养基的摇瓶内进行20~24 h 培养，2％接种体积分数接种至发酵培养基，并设定培养基环境温度为 36~39 ℃，培养 32~38h。 

CN201710194896.5 提供了一种食品级中温α-淀粉酶的生产方法，包括如下步骤：

1)中温 α-淀粉酶发酵液的制备；

2)絮凝处理；

3)过滤处理；

4)一次浓缩处理；

5)除菌处理；

6)二次浓缩处理；

7)真空低温干燥处理；

8)整粒。

该方法采用真空连续低温干燥的方法制得食品级中温 α-淀粉酶制剂，其酶活性高，流动性好，溶解速度快，无杂菌污染，生产过程无粉尘，而且操作简单，投资成本低，可连续化生产，具有良好的市场应用前景。

CN202111008204.6 公开了一种利用转基因大豆生产α-淀粉酶的方法及表达载体，其将含 α-淀粉酶表达框的表达载体导入到大豆基因组中，获得能够生产 α-淀粉酶的转基因大豆；所述 α-淀粉酶表达框包括启动子、α-淀粉酶编码基因、终止子。

该发明转基因大豆在种子中实现淀粉酶的高表达，所生产的淀粉酶的活性极高，每克种子最高10000 酶活力单位以上。

CN201910017912.2 提供了一种极端嗜盐、耐表面活性剂的非钙离子依赖型的 α-淀粉酶 AmySL3、编码上述 α-淀粉酶的基因组编码基因 AmySL3，以及包含该基因的重组载体和重组菌株。

该α-淀粉酶 AmySL3 最适 pH 7.5，最适反应温度 45 ℃。该酶极端耐盐，在 5.0 mol/LNaCl 存在的情况下酶活力最高，且在该浓度下非常稳定。该酶属于非钙离子依赖性的 α-淀粉酶，高浓度的钙离子对该酶有抑制作用。