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367-93-1

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产品图片

基本信息

中文
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
英文名称
1-ISOPROPYL-BETA-D-1-THIOGALACTO PYRANOSIDE
1-ISOPROPYL-BETA-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE
ANIMAL-FREE ORIGIN D-GALACTOSE
IPTG
IPTG, HEMIDIOXANE ADDUCT
ISOPROPYL-1-THIO-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE
ISOPROPYL-B-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE
ISOPROPYL BETA-D-1-THIOGALACTOPYRANOSIDE
ISOPROPYL-BETA-D(-)-THIOGALACTOPYRANOSIDE
ISOPROPYL-BETA-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE
ISOPROPYL-BETA-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE, DIOXANE FREE
ISOPROPYL-BETA-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE, HEMIDIOXANE ADDUCT
ISOPROPYL-BETA-D-THIOGALACTOSIDE
ISOPROPYLTHIO-BETA-GALACTOSIDE
ISOPROPYLTHIO-BETA-THIOGALACTOSIDASE
ISOPROPYLTHIO-B-THIOGALACTOPYRANOSIDE
ISOPROPYL THIOGALACTOSIDE
1-methylethyl1-thio-.beta.-D-Galactopyranoside
1-methylethyl1-thio-beta-d-galactopyranosid
isopropyl-thiogalactopyranoside
CAS
367-93-1
中文名称
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖甙
异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
异丙基-beta-D-硫代半乳糖苷
1-甲基乙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷
异丙基-&SZLIG
-D-硫代半乳糖苷
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
异丙基-BETA-D-硫代乳吡喃糖苷(IPTG)
异丙基硫代-Β-D-半乳糖苷(IPTG)
异丙基-Β-D-硫代半乳糖苷(简称IPTG)
异丙基-Β-D-硫代半乳糖苷, DIOXANE-FREE
EINECS 编号
206-703-0
分子式
C9H18O5S
MDL 编号
MFCD00063273
分子量
238.3
MOL 文件
367-93-1.mol

物理化学性质

外观性质
白色粉末。易溶于水、甲醇、乙醇,可溶于丙酮、氯仿,不溶于乙醚。是β-半乳糖苷酶和β-半乳糖透酶的诱导剂,不被β-半乳糖苷水解,是硫代半乳糖转酰酶的底物熔点:109.5~110.5℃
熔点 
105 °C
比旋光度 
-31 º (c=1, water)
储存条件 
−20°C

水溶解性 
soluble
Merck 
5082
BRN 
4631
存储注意事项
湿度敏感

应用领域

用途一
常用分子生物学试剂,常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等。

安全数据

危险品标志 
Xn
危险类别码 
R19-R40-R66
安全说明 
S23-S24/25-S36/37-S22
WGK Germany 
3


10
海关编码
29389090

化学品安全说明书(MSDS)

MSDS 信息
IPTG(367-93-1).msds

常见问题列表

概述
异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。IPTG 常用于需要诱导 β-半乳糖苷酶活性的克隆实验。它常与 X-Gal 或 Bluo-Gal 结合使用,用于重组细菌菌落的蓝白筛选,这些菌落可以诱导 lac 操纵子在大肠杆菌中的表达。IPTG 与 lacI 阻遏蛋白结合并改变其构象而发挥作用,防止 β-半乳糖苷酶编码基因 lacZ 的抑制。
诱导原理
E.coli的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节 基因I。I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状态。在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激 活蛋白(CAP)结合位点。由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达 。
在没有乳糖存在时,lac操纵子(元)处于阻遏状态。此时,I序列在PI启动序列操纵下表达的Lac阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结 合,抑制转录起动。当有乳糖存在时,lac操纵子(元)即可被诱导。在这个操纵子(元)体系中,真正的诱导剂并非乳糖本身。乳糖进入细胞,经β-半乳糖苷酶催化,转变为异乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、发生转录。异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的作用与异乳糖相同,是一 种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。
IPTG的优点
1.能诱导酶的合成,但又不被分解的分子,称为安慰诱导物。由于乳糖虽可诱导酶的合成,但又随之分解,产生很多复杂的动力学问题,因此人们常用安慰诱导物来进行各种实验。
2.IPTG不被菌体代谢,为乳糖类似物,一旦进入细胞就会产生持续长久的诱导效果,所以IPTG的诱导效率高,往往只需要很少量(1mmol/L)即可达到理想诱导效果。由于IPTG不被代谢,在胞内专一诱导外源蛋白的表达。不受细胞代谢的影响,诱导效果持续稳定。乳糖有双效作用,既能做为诱导剂异乳糖的前体物质,又可以做碳源,在诱导过程中,很不稳定,IPTG因其优异的稳定性决定了它适合做实验研究用。
3.IPTG能在缺乏lacY基因下而有效地被抄送。
4.半乳糖苷键中用硫代替了氧,失去了水解活性,但硫代半乳糖苷和同源的氧代化合物与酶位点的亲和力相同,IPTG虽不为β–半乳糖苷酶所识别,但它是lac基因簇十分有效的诱导物。
使用方法:首先把IPTG配制成23.83 mg/ml(100 mM)的水溶液,并进行过滤除菌后保存。然后在100 ml的琼脂培养基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当dna片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。
实验材料的准备
1、诱导表达材料:
( 1 ) LB (Luria—Bertani))培养基:
酵母膏 (Yeast extract) 5g 蛋白胨 (Peptone) 10g
NaCl 10g 琼脂 (Agar) 1-2%
蒸馏水 (Distilled water) 1000ml pH 7.0
适用范围:大肠杆菌
( 2 ) IPTG 贮备液:
2 g IPTG溶于10 mL 蒸馏水中,0 . 22 μm 滤膜过滤除菌,分装成1 mL /份,-20 ℃ 保存.
( 3 ) l× 凝胶电泳加样缓冲液:
50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 )
50 mmol / L DTT
2 % SDS (电泳级)
0.1 % 溴酚蓝
10 % 甘油
2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化材料:
1 )酶溶法
(1)裂解缓冲液:
50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 )
1 mmol / L EDTA
100 mmol / LNaCI
(2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF ).
(3)10 mg / mL 溶菌酶.
(4)脱氧胆酸.
(5)1 mg / mL DNase I.
2 )超声破碎法
( 1 ) TE 缓冲液.
( 2 ) 2×SDS -PAGE 凝胶电泳加样缓冲液:
100 mmol / L Tris-HCI ( pH 8 . 0 )
100 mmol / L DTT
4 %SDS
0.2 % 溴酚蓝
20 % 甘油
实验方案
1、外源基因的诱导表达:
(1)用适当的限制性内切核酸酶消化载体DNA 和目的基因.
( 2 )按连接步骤连接目的基因和载体,并转化到相应的宿主菌.
( 3 )筛选出含重组子的转化菌落,提取质粒DNA 作限制性内切核酸酶图谱,DNA 序列测定,
确定无误后进行下一步.
( 4 )如果表达载体的原核启动子为PL 启动子,则在30 -32 ℃ 培养数小时,使培养液的OD600达0.4-0.6 ,迅速使温度升至42 ℃ 继续培养3 -5h ;如果表达载体的原核启动子为tac 等,则37 ℃培养细菌数小时达到对数生长期后加IPTG 至终浓度为1 mmol / L.继续培养3 -5h .
( 5 )取上述培养液1 mL , 1000g 离心,1 min ,沉淀,加100 μL 聚丙烯酰胺凝胶电泳上样缓冲液后,作SDS -PAGE 检测.
2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白质纯化:
细菌的裂解
常用方法有:① 高温珠磨法;② 高压匀浆;③ 超声破碎法;④ 酶溶法;⑤ 化学渗透等.前三种方法属机械破碎法,并且方法① 、② 已在工业生产中得到应用,后三种方法在实验室研究中应用较为广泛.下面介绍酶溶法和超声破碎法的实验步骤.
酶溶法.常用的溶解酶有溶菌酶;β-1,3 -葡聚糖酶;β-1,6 -葡聚糖酶;蛋白酶;壳多糖酶;糖昔酶等.溶菌酶主要对细菌类有作用,而其他几种酶对酵母作用显著.主要步骤为:
4 ℃ ,5000rpm 离心,15 min ,收集诱导表达的细菌培养液(100 mL ).弃上清,约每克湿菌加3 mL 裂���缓冲液,悬浮沉淀.

图谱信息

知名试剂公司产品信息

异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷价格(试剂级)

异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷价格(试剂级)
  • 更新日期
  • 产品编号
  • 产品名称
  • 包装
  • 价格
  • 2017/06/06
  • I0328
  • 异丙基1-硫代-β-D-半乳糖吡喃糖苷
    Isopropyl 1-Thio-beta-D-galactopyranoside
  • 1G
  • 375元
  • 2017/06/06
  • I0328
  • 异丙基1-硫代-β-D-半乳糖吡喃糖苷
    Isopropyl 1-Thio-beta-D-galactopyranoside
  • 5G
  • 990元
  • 2017/06/05
  • B21149
  • 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷, dioxane-free, 99%
    Isopropyl-beta-D-thiogalactoside, dioxane-free, 99%
  • 1g
  • 638元

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