总黄酮

排石颗粒—总黄酮的测定—分光光度法

仪器设备： 1. 可见分光光度计
2. 超声波清洗器
试样制备： 1. 对照品溶液的制备
精密称取在102℃干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量使溶解，摇匀。制成每1ml含芦丁0.2 mg。
2. 供试品溶液的制备
取供试研细，取5g或1g（无糖型），精密称定，置锥行瓶中，精密加甲醇100ml，称定重量，超声提取20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml置50ml量瓶中，加水置刻度，即为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

本方法采用分光光度法测定排石颗粒中总黄酮（以芦丁计）的含量。
本方法适用于中成药排石颗粒。

供试品经甲醇超声提取，定容，取一定量上清液加0.1mol/l三氯化铝与1mol/l 醋酸钾溶液反应，再加氢氧化钠试液，用50%甲醇定容，放置一定时间后，置于分光光度计，于波长510nm处测定吸收度，计算其总黄酮[以芦丁（c27h30o16）计]的含量。

1. 甲醇
2. 10%硝酸铝溶液
3. 5%亚硝酸钠溶液
4. 氢氧化钠试液：取氢氧化钠4.3g,加水溶解成100ml。

1. 对照品溶液的制备
精密称取在102℃干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量使溶解，摇匀。制成每1ml含芦丁0.2 mg。
2. 供试品溶液的制备
取供试研细，取5g或1g（无糖型），精密称定，置锥行瓶中，精密加甲醇100ml，称定重量，超声提取20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml置50ml量瓶中，加水置刻度，即为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1. 标准曲线的绘制
精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0 ml、5.0ml，分别置10ml量瓶中，各加50%甲醇至5 ml，加5%亚硝酸钠溶液0.3 ml ，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液0.3 ml ，放置6分钟，加氢氧化钠试4ml，再加50%甲醇至刻度，摇匀，以相应的溶液为空白。照分光光度法，在510nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 供试品的测定
精密量取上述供试品溶液2ml，置10ml量瓶中，50%甲醇至刻度，摇匀，作为空白对照。另精密量取2ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇至5 ml，加5%亚硝酸钠溶液0.3 ml ，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液0.3 ml ，放置6分钟，加氢氧化钠试液4ml，再加50%甲醇至刻度，照分光光度法，在510nm波长处测定吸收度，从标准曲线上读出供试品中芦丁的量，计算。