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反丁烯二酸

供应商 方法名称 仪器设备 应用范围 方法原理 试剂 试样制备 操作步骤

方法名称

复方草珊瑚含片—反丁烯二酸的测定—高效液相色谱法

仪器设备

仪器设备： 1. 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
为pinnale amino色谱柱（5μm, 250×4.6mm）。
1.3 紫外吸收检测器
2. 色谱条件
2.1 流动相：0.4%磷酸二氢钾溶液(以磷酸调ph值为2.5~3.0)。
2.2 检测波长：210nm
2.3柱温：室温
试样制备： 1. 称取供试品
取本品10片, 研细（过5号筛，80目）, 精密称取2.0g。
2. 对照品溶液的制备
精密称取反丁烯二酸对照品0.1g，置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀匀，作为对照品储备液。
3. 标准溶液的制备
精密量取对照品储备液1.0，2.0，5.0，10.0，15.0，25.0ml, 分别置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。
4.供试品溶液的制备
将供试品置100ml量瓶中，加90ml流动相溶液，超声处理1h，放冷，加流动相溶液定容，摇匀，滤过，取续滤液为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

应用范围

本方法采用高效液相色谱法测定复方草珊瑚含片中反丁烯二酸的含量。
本方法适用于复方草珊瑚含片。

方法原理

供试品研细，置容量瓶中, 加hplc分析流动相进行超声提取，放冷，加流动相定容，摇匀,滤过,取续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长210nm处检测反丁烯二酸的吸收值，计算出其含量。

试剂

1. 乙腈（色谱纯）
2. 磷酸二氢钾
3. 磷酸

试样制备

1. 称取供试品
取本品10片, 研细（过5号筛，80目）, 精密称取2.0g。
2. 对照品溶液的制备
精密称取反丁烯二酸对照品0.1g，置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀匀，作为对照品储备液。
3. 标准溶液的制备
精密量取对照品储备液1.0，2.0，5.0，10.0，15.0，25.0ml, 分别置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。
4.供试品溶液的制备
将供试品置100ml量瓶中，加90ml流动相溶液，超声处理1h，放冷，加流动相溶液定容，摇匀，滤过，取续滤液为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤

1. 标准曲线绘制
精密吸取上述标准溶液20μl注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定反丁烯二酸的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。
2. 供试品的测定
精密吸取供试品溶液20μl注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长210nm处测定反丁烯二酸的吸收值，计算出其含量。
反丁烯二酸生产厂家