CRISPR/CAS9 载体设计与构建

CRISPR/Cas9 (Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/ CRISPR-associated protein 9) 技术是最近发现的一种基因组靶向修饰技术。与之前的技术相比，CRISPR/Cas9技术是通过一段RNA来识别靶位点，因而在设计和构建上更加简单。迄今为止，CRISPR/Cas9技术已成功应用于肺炎链球菌Streptococcus pneumoniae、大肠杆菌Escherichia coli、芽殖酵母Saccharomyces cerevisiae、秀丽线虫Caenorhabditis elegans、果蝇Drosophilamelanogaster、斑马鱼Danio rerio、小鼠Mus musculus、大鼠Rattus norvegicus、拟南芥、玉米Zea mays、水稻和小麦Triticum aestivum以及包括iPS细胞在内的人体外培养细胞系等多个物种内源性基因的定点修饰。因此CRISPR/Cas9 载体设计与构建非常重要。