"CAL-51 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
细胞背景资料：乳腺癌；胸腔积液转移；女性
细胞形态：上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞生长：贴壁
GB-1细胞类似产品：：DLD-1细胞、RPVSMC细胞、MOLT3细胞
Hx-147细胞类似产品：：PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞
Hep3B细胞类似产品：：P3J-HR-1细胞、OCI-AML3细胞、IPI-2I细胞
HeLa/DDP细胞类似产品：：COLO 320细胞、KATO 3细胞、L-6 myoblast细胞
Line 870 Emory University-4细胞类似产品：：CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞
CAL-51 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCC-78细胞类似产品：：H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞
A 72细胞类似产品：：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞
Swiss 3T6细胞类似产品：：GM02219D细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞、KM-12细胞
Hs746-T细胞类似产品：：DU 4475细胞、NCI-H2126细胞、KY-270细胞
Tsup-1细胞类似产品：：CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
CAL-51 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
细胞生长特性：贴壁
ME1细胞类似产品：：TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞
SR-786细胞类似产品：：OCI/AML-4细胞、EFM-192B细胞、SK-RC-52细胞
OsA-CL细胞类似产品：：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
HCC1569细胞类似产品：：MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞
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Embryonic Bovine Tracheal cells细胞类似产品：：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。
FK81细胞类似产品：：TK-10细胞、DMS53细胞、A375SM细胞
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GM-215细胞类似产品：：H2286细胞、KP-N-YN细胞、MonoMac 6细胞
COLO 320F细胞类似产品：：G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞
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C3H10T1/2CL8细胞类似产品：：SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞
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GM07404D细胞类似产品：：H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
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SNU-878细胞类似产品：：HR8348细胞、BMSC/hBMSCs细胞、ARPE19细胞
MDA-MB231细胞类似产品：：SF-126细胞、HMEL细胞、AN-3细胞
373 MG细胞类似产品：：DMS-153细胞、HEL9217细胞、hUC-MSC细胞
Hs852T细胞类似产品：：UCLA NPA871细胞、NCI-H1573细胞、KTA-7细胞
GM07404细胞类似产品：：639-V细胞、Pa017C细胞、OCI/AML-5细胞
GM03570细胞类似产品：：Onda 11细胞、NIHOVCAR3细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞
RL-952细胞类似产品：：B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞
CCK-81细胞类似产品：：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞
KYSE0520细胞类似产品：：Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
Line 207细胞类似产品：：HCC1806细胞、BC-022细胞、U251-MG细胞
HL-1细胞类似产品：：HK-2 [Human kidney]细胞、H1792细胞、OCI-Ly7细胞
NRK 49F细胞类似产品：：MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
LM1细胞类似产品：：MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞
TFK-1细胞类似产品：：PNT1A细胞、MES-SA-Dx5细胞、MDA PCa 2b细胞
AdHek细胞类似产品：：BHT101细胞、WPE-int细胞、Hs 766细胞
CAL-51 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
H2228细胞类似产品：：Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、N87细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞
Hx147细胞类似产品：：343 MG细胞、BJAB细胞、COLO 394细胞
Ca759细胞类似产品：：130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
BALB/3T3 clone A31细胞类似产品：：CHO-ori细胞、RC-2细胞、LS-174细胞
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F9细胞类似产品：：Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
GC1-SPG细胞类似产品：：SaOS-2细胞、SUM149-PT细胞、H-1048细胞
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YAC细胞类似产品：：NUGC-2细胞、SUDHL5细胞、MCA-205细胞
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HEK-293-H细胞类似产品：：LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞
HEL9217细胞类似产品：：Kato-III细胞、H1836细胞、TE 85.T细胞
H-64细胞类似产品：：IOSE-80细胞、RDES细胞、HPASMC细胞
MDA MB 436细胞类似产品：：U266-B1细胞、EAC-E2G8细胞、KM12-SM细胞
SMA560细胞类似产品：：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞
ASPC1细胞类似产品：：HT-144细胞、TE671/RD细胞、MFM223细胞
T2细胞类似产品：：HCC-38细胞、Mel-624细胞、Hs-695-T细胞
U-343 MG细胞类似产品：：MGH-U3 (RN)细胞、H735细胞、H1385细胞
Anip-973细胞类似产品：：D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞
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CAKI1细胞类似产品：：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
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