"RBE4 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠脑血管内皮细胞
细胞背景资料：２型腺病毒转化；SD大鼠
细胞形态：上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞生长：贴壁
OVCAR-420细胞类似产品：：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
Metastatic Variant 522细胞类似产品：：ZR-75-30细胞、MV3细胞、MKN-74细胞
DAKIKI Clone 1细胞类似产品：：A-431细胞、766T细胞、LLC-MK-2细胞
NBL_S细胞类似产品：：KCL22细胞、HEK.EBNA细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞
SNU-216细胞类似产品：：MHCC97-L细胞、JVM-3细胞、M-NFS-60细胞
RBE4 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠脑血管内皮细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞培养更HAO经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很HAO时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
COLO 206细胞类似产品：：H-1650细胞、MC-3T3-E1细胞、HEC-1-A细胞
LNCaP细胞类似产品：：Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞
MHCC97-L细胞类似产品：：SKCO1细胞、SACC83细胞、NCI-H2126细胞
MOLT-16细胞类似产品：：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、HT 144细胞、NCIH1437细胞
H-1522细胞类似产品：：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁
Chinese Hamster Ovary细胞类似产品：：Hs934T细胞、SKBR-3细胞、MGC-803细胞
Lu99A细胞类似产品：：B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞
A-10细胞类似产品：：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞
GM03190细胞类似产品：：H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞
CEM-C7细胞类似产品：：CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
Wien-133细胞类似产品：：NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得Zui多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节HAO酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。YOU点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。别适用那些贴壁不是别紧，又别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
PaCa2细胞类似产品：：NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞
HRA19细胞类似产品：：UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞
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H1781细胞类似产品：：MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞
NCI H548细胞类似产品：：HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞
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P388D1细胞类似产品：：MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞
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Clone M-3细胞类似产品：：MDA-MB435细胞、MOPC细胞、SNU-368细胞
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C 6细胞类似产品：：3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞
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HECCL-1细胞类似产品：：K422细胞、OK细胞、H-1694细胞
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130T细胞类似产品：：L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞
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SNU638细胞类似产品：：NIH:OVCAR3细胞、SP2-0-Ag14细胞、AD293细胞
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NCI-H1993细胞类似产品：：PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞
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A673细胞类似产品：：MKN1细胞、SHI-1细胞、UCW 100细胞
OE21细胞类似产品：：NCI-H508细胞、ECV304细胞、H64细胞
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DMS273细胞类似产品：：CF PAC-1细胞、CC-LP-I细胞、P-815细胞
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3T3F442A细胞类似产品：：Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
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BHK 21细胞类似产品：：NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞
Colon26细胞类似产品：：ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
LIPF155C细胞类似产品：：DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞
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T.T细胞类似产品：：SNU5细胞、H1838细胞、KNS81细胞
H-2405细胞类似产品：：Lu-99A细胞、WiDr细胞、WM115F细胞
M109细胞类似产品：：JAR细胞、RGC5细胞、Hs895.T细胞
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L6565细胞类似产品：：GM00637F细胞、MB157细胞、DU145细胞
H-128细胞类似产品：：NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞
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WM2664细胞类似产品：：A-172 MG细胞、P3J HR1-K细胞、KYSE 50细胞
CMT-93细胞类似产品：：Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
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HBE 135-E6E7细胞类似产品：：SaOS细胞、HPAEpiC细胞、Clone 929细胞
LM-TK-细胞类似产品：：RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞类似产品：：293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞
NCI-H1048细胞类似产品：：TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞
EA. hy 926细胞类似产品：：SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞
CAL-39细胞类似产品：：B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
SL-1细胞类似产品：：C22 (Clara)细胞、H-2342细胞、HBL100细胞
HCO细胞类似产品：：SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
CHO Lec1细胞类似产品：：Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞
H69细胞类似产品：：KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞
PC3-M细胞类似产品：：Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞
Hs832T细胞类似产品：：PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
WISH细胞类似产品：：OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞
NPA87细胞类似产品：：DU 145细胞、Sc-1细胞、SHEP1细胞
8505C细胞类似产品：：BGC823细胞、NCI-H1930细胞、Danio rerio Gill细胞
LIXC002细胞类似产品：：OCI/AML4细胞、Becker细胞、PC2细胞
LP-1细胞类似产品：：KYSE520细胞、Colon26细胞、HIBEC细胞
HIT clone T15细胞类似产品：：NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞
J45.01细胞类似产品：：H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞
HuT-78细胞类似产品：：LLC-PK1细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞、LS-513细胞
A549细胞类似产品：：D-341Med细胞、38C13细胞、CATHa细胞
WEHI231细胞类似产品：：LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞
SK.MEL.2细胞类似产品：：Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞
M109细胞类似产品：：JAR细胞、RGC5细胞、Hs895.T细胞
HT144细胞类似产品：：PCI-4.2细胞、COLO829细胞、HEK 293-H细胞
526细胞类似产品：：SK-RC-52细胞、LUDLU-1细胞、H548细胞
H-820细胞类似产品：：PC-3M IE8细胞、HNE-2细胞、Onda 11细胞
NCI-H1522细胞类似产品：：H441细胞、GM03671细胞、SK-HEP-1细胞
Ramos (RA)细胞类似产品：：BALB/3T3 clone A31细胞、H19-7细胞、Nb-2细胞
GM03320D细胞类似产品：：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
GM03320D细胞类似产品：：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
YES-2细胞类似产品：：NCI-H889细胞、OCI-LY-18细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞
T. T细胞类似产品：：Experimental Mammary Tumour-6细胞、FDC-P1细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞
NCI-H1373细胞类似产品：：HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞
Panc 2.03细胞类似产品：：CC-LP-1细胞、SNU-368细胞、SKML-28细胞
HN4细胞类似产品：：LA4细胞、MDA361细胞、H-1618细胞
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Nb2a细胞类似产品：：CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞
SJSA细胞类似产品：：CAL 12T细胞、MHCC-LM3细胞、Th17细胞
PM6细胞类似产品：：H-1694细胞、hEEC细胞、HCT116细胞
HT29细胞类似产品：：SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞
NE-4C细胞类似产品：：PK-136细胞、rRMECs细胞、NuTu-19细胞
H1417细胞类似产品：：Jiyoye细胞、GM03671C细胞、GM2131细胞
V-79-4细胞类似产品：：HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞
COLO320-DM细胞类似产品：：HuO9细胞、CCRF-CEM C1细胞、AMJ2C8细胞
MeWo细胞类似产品：：OCI-Ly3细胞、87 MG细胞、OS-732细胞
RPMI7951细胞类似产品：：SK-N-BE(2)-C细胞、MKN 45细胞、LN-229细胞
HEI193细胞类似产品：：CALU1细胞、DMS-273细胞、SCC7细胞
MV 4;11细胞类似产品：：KYSE 140细胞、CV-1.K细胞、RAW2647细胞
Panc-10.05细胞类似产品：：OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
HepaRG细胞类似产品：：Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
BE2M17细胞类似产品：：LLC-PK-1细胞、KU 19-19细胞、Ketr-3细胞
SUM190细胞类似产品：：SW 780细胞、JURKAT E-61细胞、SCC15细胞
SKNEP1细胞类似产品：：PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞
H-1836细胞类似产品：：Colo699细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、SK-N-AS细胞
AC29细胞类似产品：：HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞
STO细胞类似产品：：NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞
Mink Lung细胞类似产品：：NCI-H1915细胞、HCC-44细胞、LNCaP clone FGC细胞
H548细胞类似产品：：Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞
MCA205细胞类似产品：：JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞
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SK-MEL-24细胞类似产品：：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
TYKnu细胞类似产品：：NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞
T-47D细胞类似产品：：149 PT细胞、HT115细胞、BCaP-37细胞
LNCaP subline C4-2细胞类似产品：：Swiss3T3细胞、SK_HEP1细胞、CHO/dhFr-细胞
NCTC929细胞类似产品：：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
SKNEP1细胞类似产品：：PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞
RC-2细胞类似产品：：HR-1细胞、HPDE细胞、OKT3细胞
SUD4细胞类似产品：：HNTEC细胞、T HEECs细胞、Hs688(A)T细胞
KE 37细胞类似产品：：SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
UACC-812细胞类似产品：：HT144-mel细胞、CL 1-5细胞、H69C细胞
SUM 102PT细胞类似产品：：H660细胞、BC-009细胞、SK-LU-1细胞
RenCa细胞类似产品：：NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
OVCAR.8细胞类似产品：：H-446细胞、HCM细胞、IPLB-Sf21AE细胞
Epstein-Barr-1细胞类似产品：：HIT T-15细胞、HCC1359细胞、MDCC-MSB-1细胞
CCK81细胞类似产品：：HLE-B3细胞、IOSE29细胞、NCI H23细胞
NCM-460细胞类似产品：：H-2227细胞、H-220细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞
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