NSC-34 Cells(赠送Str鉴定报告)|鼠神经元细胞

"NSC-34 Cells(赠送Str鉴定报告)|鼠神经元细胞

细胞背景资料：神经元

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

P3X63Ag8-6-5-3细胞类似产品：：SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞

MDAMB-231细胞类似产品：：KTCTL140细胞、SUM 149PT细胞、PC3-M细胞

Calf Pulmonary Artery 47细胞类似产品：：SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞

KYSE 510细胞类似产品：：NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞

FRTL 5细胞类似产品：：RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞

NSC-34 Cells(赠送Str鉴定报告)|鼠神经元细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中的“六要”“三不要”“三勤”：有的人认为细胞培养很难，经常一不留神就把细胞污染了，牢记细胞培养中的六“要”三“不要”三“勤”让你成功培养出你想要的细胞！六“要”：1、拿到新细胞的时候要做HAO支原体检测，不管是买的细胞、惠赠的细胞，并迅速扩增冻存。2、离开细胞房的时候要给细胞房照紫外，超净台要用完就开紫外。3、离开过操作台的东西再进入操作台之前一定要用酒精喷一遍，包括一切实验耗材、仪器、以及你带着手套的手。4、培养基的话Zui多不要超过2天就要换一次。细胞可以不传代，但是培养基是一定要换的。5、发现有污染要迅速处理掉，别是同时养了很多种细胞; 细菌污染、真菌污染很容易发现（这两种污染绝对是环境中带来的，多注意一下卫生条件是可以杜绝的），支原体污染的话，细胞会长的慢，若是珍贵的细胞可以买个支原体清除剂杀一杀，还是可以挽救的。6、冻存细胞复苏后第二天要更换一次培养基。三“不要”：1、不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套。2、不要怕浪费，枪头什么的只要有可能污染就换，如果用酒精灯就什么都稍微烤一下。3、身体的各个部分不要接触不需要接触的地方。比如实验台，又比如培养箱内部。三“勤”：1、勤换水，水浴锅很脏，细胞培养箱要是得手动加湿的话，盘里的水也会很脏。那种公用的水浴锅、培养箱，定期换水习惯不HAO的，交叉污染严重的，那就可以选择一些绿色、安全、无刺激性的除菌剂，改善一下，免得细胞遇到污染时措手不及。2、勤擦洗，培养箱隔一段时间彻底用安全除菌剂擦洗一次，有人用酒精擦洗，但毕竟究竟只能除掉细菌，对于真菌是没有办法杀死的，所以这里推荐大家选用效果和口碑都不错的除菌剂处理。3、勤清洁，细胞房日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸。养细胞就像打仗，知彼知己，百战不殆。做到以上几点，细胞培养易如反掌，导师再也不用担心我的细胞养死了。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HRIF细胞类似产品：：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞

D283-MED细胞类似产品：：MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞

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SW839细胞类似产品：：RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞

SNU387细胞类似产品：：3T3L1细胞、SNU739细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

32D:cl3细胞类似产品：：Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞

LIM1215细胞类似产品：：HCC44细胞、HL60细胞、MDAMB468细胞

CCLP1细胞类似产品：：HS0578T细胞、P3X63-Ag8.653细胞、F442-A细胞

3T3细胞类似产品：：Me-Wo细胞、WERIRb1细胞、Line 207细胞

UWB1-289细胞类似产品：：A2780/CP细胞、HHFK细胞、DBTRG-05MG细胞

Rat1细胞类似产品：：INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

HS766T细胞类似产品：：CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞

MCF 7B细胞类似产品：：J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞

MDA 1386细胞类似产品：：LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞

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253JBV细胞类似产品：：BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞

U118-MG细胞类似产品：：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞

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KRC Y细胞类似产品：：L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞

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NSC-34 Cells(赠送Str鉴定报告)|鼠神经元细胞

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Tu 212细胞类似产品：：H-187细胞、769P细胞、ssMCF7细胞

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Vero 76细胞类似产品：：SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞

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NSC-34 Cells(赠送Str鉴定报告)|鼠神经元细胞

HTori:3细胞类似产品：：KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞

HepG2/C3A细胞类似产品：：SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞

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Mo 59J细胞类似产品：：GA-10 clone 4细胞、HuTu 80细胞、Ca759细胞

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