PK-15 Cells(赠送Str鉴定报告)|猪肾细胞

"PK-15 Cells(赠送Str鉴定报告)|猪肾细胞

细胞背景资料：PK-１５细胞建系于１９５５（Stice,E）。是PK-１a细胞的克隆系。该细胞系可用于多种病毒的增值及特性研究。另外，电镜观察发现，PK-１５细胞内有C-型病毒颗粒存在，是研究C-型病毒的材料。

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，HAO象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，GAO倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良HAO，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提GAO细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

细胞生长：贴壁

Pan02细胞类似产品：：OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞

D407细胞类似产品：：NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞

JCA-1细胞类似产品：：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞

WM 239细胞类似产品：：PAEC细胞、DLD-1细胞、HCT8细胞

F442-A细胞类似产品：：MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞

PK-15 Cells(赠送Str鉴定报告)|猪肾细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养更HAO经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很HAO时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

DOK细胞类似产品：：GM12878细胞、Nthy ori 3.1细胞、NB-19细胞

LLCPK1细胞类似产品：：SK-NMC细胞、B-CPAP细胞、HBEpiC细胞

3 LL细胞类似产品：：UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞

ACCM细胞类似产品：：Rat Skin 1细胞、143B细胞、SW626细胞

SBC3细胞类似产品：：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

Colo699细胞类似产品：：H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞

SNU638细胞类似产品：：NIH:OVCAR3细胞、SP2-0-Ag14细胞、AD293细胞

SUM-149细胞类似产品：：RAMOS2G64C10细胞、HMEC-1细胞、KYSE-150细胞

RBMEC细胞类似产品：：mRTEC细胞、Hs 729细胞、Ramos(RA1)细胞

DMS 114细胞类似产品：：MDAMB175VII细胞、BrCL12细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞

GM 2132细胞类似产品：：GM04154B细胞、GI-1细胞、EFM-192A细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿HAO隔离衣，戴HAO口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。

JURKAT E-6.1细胞类似产品：：MEL细胞、NCIH647细胞、Balb/c3T3细胞

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MDA-330细胞类似产品：：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞

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KYSE0410细胞类似产品：：H929细胞、GTL-16细胞、SKG-IIIa细胞

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NCI-H165细胞类似产品：：H69C细胞、MC-4细胞、HPF细胞

CCRF SB细胞类似产品：：H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞

ME180细胞类似产品：：PNT1-a细胞、L78细胞、Fetal Human Colon细胞

U20-S细胞类似产品：：MCF-12F细胞、OPM-2细胞、HuT-102细胞

UMR106细胞类似产品：：TGW-nu细胞、IGROV-1细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞

P3-NS1/1Ag 4.1细胞类似产品：：SIRC细胞、SU-86-86细胞、SKGIIIA细胞

Hepatoma 22细胞类似产品：：GM03190A细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、H2330细胞

C918细胞类似产品：：SW620细胞、MUG-Chor1细胞、MS751细胞

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