SV-HUC-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|人膀胱上皮永生化细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

Vero细胞类似产品：：H3255细胞、A-375SM细胞、32D.3细胞

MES 23.5细胞类似产品：：C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞

VMCUB-1细胞类似产品：：Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞

HEC151细胞类似产品：：Monomac-1细胞、LN-382细胞、253J细胞

Panc-1-P细胞类似产品：：NCI-H460细胞、GM03570E细胞、PLA801-95D细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养更HAO经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很HAO时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。

细胞传代方法：１：２传代

NCI-H2591细胞类似产品：：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞

HCC0070细胞类似产品：：NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞

MDA-MB-175VII细胞类似产品：：H-2108细胞、SF767细胞、BNL-HCC细胞

NL-20细胞类似产品：：RERF-LC-MS细胞、9L细胞、Hs832.Tc细胞

Jijoye细胞类似产品：：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长　

NSC-34细胞类似产品：：CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞

H727细胞类似产品：：OCM-1细胞、A2780/CP70细胞、NCI-H358细胞

NCI-H520细胞类似产品：：Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞

HT 1080细胞类似产品：：KG1A细胞、SKNBE(2)细胞、RMG-1细胞

SW 579细胞类似产品：：ATN-1细胞、WM 115细胞、EPC细胞

PAa细胞类似产品：：ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞

造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

COLO 320F细胞类似产品：：G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞

OP9细胞类似产品：：SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞

PL9细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-78细胞、CAKI1细胞、MDA-MB-231-GFP细胞

NCI-H1373细胞类似产品：：HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞

NCI-H920细胞类似产品：：HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞

SUDHL-8细胞类似产品：：SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞

C518细胞类似产品：：MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞

L 929细胞类似产品：：SUNE-1细胞、HPAF-II/CD18细胞、H711细胞

Normal Rat Kidney细胞类似产品：：526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞

HET-1A细胞类似产品：：GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞

NUGC2细胞类似产品：：SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞

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Dami细胞类似产品：：H-1954细胞、SK-NMC细胞、U-138MG细胞

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HRPEpiC细胞类似产品：：HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞

PNT1-a细胞类似产品：：DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞

KE 37细胞类似产品：：SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞

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COLO-394细胞类似产品：：H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞

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SK-OV-3细胞类似产品：：WM-239-A细胞、TCMK1细胞、NCIH2405细胞

NCIH1092细胞类似产品：：RCC-JF细胞、D283细胞、SK-OV-433细胞

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Medical University of Graz-Chordoma 1细胞类似产品：：HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞

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LoMeT-ccRcc细胞类似产品：：RASMCs细胞、EoL-1细胞、OVCAR.5细胞

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SAOS 2细胞类似产品：：EO771细胞、SU.86细胞、Toledo细胞

HUTU80细胞类似产品：：SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞

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U373MG细胞类似产品：：TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞

C12细胞类似产品：：DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞

Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞类似产品：：GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞

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NTERA-2 cl.D1细胞类似产品：：GM02219细胞、HMC3细胞、B16/F1细胞

TN5B14细胞类似产品：：MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞

H-2107细胞类似产品：：rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞

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BMSCs（mBMSCs）细胞类似产品：：U-2OS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞

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SUM 190PT细胞类似产品：：LS174T细胞、HeLaS3细胞、NE-1细胞

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AtT20细胞类似产品：：U138MG细胞、HS-766T细胞、PA12细胞

IA-LM细胞类似产品：：CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞

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PE/CA-PJ34细胞类似产品：：HIT-T15细胞、NS20-Y细胞、Hce8693细胞

CL MC/9细胞类似产品：：HFL 1细胞、Walker256-TC细胞、NOR-10细胞

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NOK细胞类似产品：：Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、RPMI 1846细胞、DoHH2细胞

PANC-08-13细胞类似产品：：SUM102细胞、JROECL21细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

细胞

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MUTZ-3细胞类似产品：：H1915细胞、NCIH1734细胞、DV-90细胞

KM12细胞类似产品：：Farage Original Line细胞、NCI-H165细胞、SW-839细胞

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