"COV362 Cells(赠送Str鉴定报告)|人卵巢癌细胞
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞生长：贴壁
H-1573细胞类似产品：：HUCEC细胞、RCSMC细胞、SkChA-1细胞
SNU-354细胞类似产品：：SK RC 20细胞、Ketr-3细胞、NCTC-1469细胞
PANC1005细胞类似产品：：H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞
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COV362 Cells(赠送Str鉴定报告)|人卵巢癌细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
细胞传代方法：１：２传代
Malme3M细胞类似产品：：NCIH1993细胞、MDCK2细胞、HEP3B2细胞
HPMEC细胞类似产品：：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
P3X63Ag8.653细胞类似产品：：SW 48细胞、CMT-167细胞、Beta-TC-6细胞
KYSE140细胞类似产品：：H1573细胞、BJ1细胞、H1299细胞
H460细胞类似产品：：Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
COV362 Cells(赠送Str鉴定报告)|人卵巢癌细胞
细胞生长特性：贴壁生长
RPTEC/TERT1细胞类似产品：：PTK-2细胞、H1819细胞、NT2细胞
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细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！
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HIMEC细胞类似产品：：NCI-157细胞、2V6.11细胞、SCL-2细胞
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COV362 Cells(赠送Str鉴定报告)|人卵巢癌细胞
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C3H10T1/2 clone8细胞类似产品：：COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞
BC3H-1细胞类似产品：：769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞
REC-1细胞类似产品：：NCI-H-82细胞、MDA-MB 361细胞、SY5Y细胞
MDA-MB415细胞类似产品：：VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞
Tu-686细胞类似产品：：HEK-AD 293细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、ROS 17/2.8细胞
INS1E细胞类似产品：：HEC1B细胞、KTCTL140细胞、HEK 293T/17细胞
KAT-5细胞类似产品：：NCIH2030细胞、NCIH1993细胞、CMT93细胞
3T3 L1细胞类似产品：：NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
Hs895.T细胞类似产品：：BMU-S1细胞、D10细胞、H1395细胞
HCC38细胞类似产品：：NCI-H2171细胞、MLE12细胞、Hs1.Tes细胞
RPMI7666细胞类似产品：：MFD-1细胞、NCI-H820细胞、P388D1细胞
NCI-H322细胞类似产品：：CEM-T4细胞、TKB-1细胞、TGW细胞
BAR-T细胞类似产品：：OVCAR8细胞、NCIH250细胞、NCI-HUT-460细胞
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