"MDA-MB-361 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
细胞背景资料:该细胞源自40岁女性乳腺癌的脑转移组织。
细胞形态:上皮细胞样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞Zui大的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞生长:贴壁
rRMECs细胞类似产品::NEC-8细胞、751-NA细胞、U 937细胞
HS-5细胞类似产品::HEK293-F细胞、HEK293细胞、TN5B14细胞
Ca-Ski细胞类似产品::LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞
MESSA细胞类似产品::M109细胞、KYSE-70细胞、L1210细胞
RS(4;11)细胞类似产品::Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
MDA-MB-361 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞培养更HAO经验详解:1)收到细胞,首先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察,细胞初步没有问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生长期,恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态,在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很HAO时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,次处理也可以依照第二种情况。
细胞传代方法: 1:2—1:6传代,每周换液2—3次
HL-1细胞类似产品::HK-2 [Human kidney]细胞、H1792细胞、OCI-Ly7细胞
PG-4 (S+L-)细胞类似产品::SB细胞、MCF7细胞、COC1/CDDP细胞
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DLD1细胞类似产品::AgC11x3A细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、Mahlavu细胞
LICCF细胞类似产品::Emory University-3细胞、DB细胞、EJ1细胞
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
MDA-MB-361 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
细胞生长特性:松散贴壁生长
H650细胞类似产品::K1细胞、SK HEP 01细胞、RLE-6TN细胞
SUDHL-4细胞类似产品::NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞
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H-1819细胞类似产品::5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
DI TNC1细胞类似产品::H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞
为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液HAO不HAO,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不HAO。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
NCI-157细胞类似产品::KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞
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AM38细胞类似产品::RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
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NCI-SNU-16细胞类似产品::IHH细胞、NTERA-2细胞、T98细胞
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SK MES 1细胞类似产品::OVCAR.3细胞、D-283MED细胞、LNCaP C4-2细胞
NCI-H1648细胞类似产品::CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞
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SK BR 03细胞类似产品::3T3NIH细胞、KTC1细胞、Hs 739.T细胞
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CV-1 in Origin Simian-1细胞类似产品::H-1993细胞、PG-4 (S+L-)细胞、TF-1a细胞
KPL4细胞类似产品::GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
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V-79-4细胞类似产品::HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞
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SW620细胞类似产品::Granta 519细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、Vero-76细胞
Detroit-562细胞类似产品::T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
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SKOV3细胞类似产品::MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞
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PGBE1细胞类似产品::Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
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OCI Ly10细胞类似产品::SCL-1细胞、HD-LM-2细胞、A2780-CP细胞
KCL22细胞类似产品::GC9811-P细胞、EC-GI细胞、Hs27F细胞
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SkChA-1细胞类似产品::CMT93细胞、Human ErythroLeukemia细胞、H-211细胞
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Medical Research Council cell strain-5细胞类似产品::SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞
H1435细胞类似产品::Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞
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SDBMSC细胞类似产品::hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞
Nthy ori 3.1细胞类似产品::SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
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Hela-mock细胞类似产品::LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞
4175细胞类似产品::OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞
Panc02-H0细胞类似产品::PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
OPM-2细胞类似产品::NK-92MI细胞、OVCAR-420细胞、MSC细胞
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ECC10细胞类似产品::HCT116细胞、AM-38细胞、UPCISCC090细胞
253J B-V细胞类似产品::MNNG/HOS Cl #5细胞、HEC-1A细胞、H838细胞
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HEK-293H细胞类似产品::SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
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Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞类似产品::CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞
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HO-8910细胞类似产品::H2081细胞、LA-795细胞、SUM159PT细胞
NK92细胞类似产品::HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞
MDA-MB-361 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞
BJA-B-1细胞类似产品::GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞
CMT 167细胞类似产品::LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
UO.31细胞类似产品::MDA-MB-134 VI细胞、GB-1细胞、NBL-1细胞
IGROV细胞类似产品::HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞
JIMT-1细胞类似产品::TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
PLC PRF 5细胞类似产品::RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞
CCRF-CEM C7细胞类似产品::1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
HCC-1954BL细胞类似产品::Walker256-TC细胞、WSUDLCL2细胞、MEF细胞
HET1A细胞类似产品::COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
Swiss-3T3细胞类似产品::H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
A172细胞类似产品::OCI-Ly 8细胞、SN12C-PM6细胞、RPMI-7951细胞
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RIMEC细胞类似产品::AKR细胞、H-2081细胞、H8细胞
NK92MI细胞类似产品::KYSE 450细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、Lu99A细胞
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MES23.5细胞类似产品::NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
CAL 78细胞类似产品::SNU-387细胞、U138-MG细胞、MB49细胞
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NSH细胞类似产品::THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
Loucy细胞类似产品::Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞
AML 12细胞类似产品::Kit225 K6细胞、NCI-H1882细胞、NCIN87细胞
McA-RH 7777细胞类似产品::H157细胞、Eca-109细胞、SW1222细胞
UM-UC-14细胞类似产品::CF-1 MEF细胞、NIH 3T3细胞、HCC1500细胞
SK-RC-52细胞类似产品::SC细胞、CNE1-LUC细胞、NCIH209细胞
A9(Hamprecht)细胞类似产品::Mel624细胞、PLA801C细胞、VMM-5A细胞
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