"CCD-18Co正常人结肠成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)
细胞生长:贴壁
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞内空泡通常是细胞受到压力的表现,原因可能是培养基中缺乏谷氨酰胺、添加抗真菌剂、不适当的CO2环境对培养基中碳酸氢钠浓度或培养基的营养消耗殆尽。一般来说,对于某些细胞系,尤其是向3T3-L1这样具有脂滴的细胞,细胞包含空泡是正常的。缺氧:当缺氧时 细胞na泵动力不足导致细胞内水储留,Na泵动力不足导致其不能向细胞外运送足量的Na,从而使细胞内处于GAO渗透压状态,更多胞外水分子进入胞内,造成水储留。可以理解为因为水分的流失,细胞内出现细胞质的浓缩,从而出现空泡。原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况,是有些细胞处于终末分化状态,不会再分裂,时间长了就会空泡化而死亡。传代细胞出现这种状况比较少见,可能的原因是细胞代龄较长,老化严重。传代次数太多,细胞老化会出现上述的情况,但是还不排除其他因素,胞质中出现颗粒、脂滴或空泡也可能是细胞代谢不良的反应。我前一段时间养成纤维细胞(原代)的时候也出现过类似的情况。可以将血清的浓度提GAO10%到15%到20%;血清的质量,如果是国内的血清的话不同的批次之间的差异很大,可以借用些质量HAO的血清试试,看细胞状态是否会改变;把细胞消化收集起来,然后离心后重悬,重新种植。培养基里添加谷氨酰氨;细胞代谢障碍的问题,传代的次数可能不是关键因素,应该可以调整得过来;PH值不对,就用PH值试纸测了一下,大概6.7左右,加碳酸氢钠调到7.2左右,过了一段就HAO了。不排除轻度污染的可能,重度污染会伴有培养液的浑浊;培养液的PH值与细胞正常所需PH值差别太大;还有一个大家易忽略的问题,我们从相关权威资料中查到如果消化细胞吹打时力度过大,产生太多气泡,长期存在也会出现这种现象。
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞类似产品::A375SM细胞、RL-95-2细胞、IB-RS-2细胞
IA-LM细胞类似产品::CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞
NCIH1666细胞类似产品::MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞
JeKo 1细胞类似产品::HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CCD-18Co正常人结肠成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)
养细胞真的不难,关键几点:所有的东西使用的,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏。动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外,要掌握HAO胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因。有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措。要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,细胞房的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验。个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢。细胞房不能进去太多人,避免相互干扰。
细胞背景资料:结肠;成纤维细胞;女性
细胞形态:成纤维细胞样
CCD-18Co正常人结肠成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
Wien 133细胞类似产品::NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞
SW-756细胞类似产品::CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞
CCRF/CEM细胞类似产品::M-1细胞、PL 5细胞、DHBE细胞
Hs606T细胞类似产品::FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
A.704细胞类似产品::HEK293-EBNA细胞、16HBE140细胞、HSC-2细胞
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
传代细胞时,使用无菌技术和合适的试剂及设备尤为重要。针对您的细胞系选择合适的培养液来得到佳的生长和扩增很关键。每一个细胞系都有定的生长营养组分配方,但是大多数细胞系起码需要的添加物有以下这些:血清,如胎牛血清,需热处理灭活其胎牛成分,它为细胞生长提供重要的生长因子。抗生素,如青霉素和链霉素用于防止细胞污染。其他的生长因子,如成纤维细胞生长因子,有助于延长细胞系的生长和扩增。不使用时,要将这些添加物或者“完全”细胞培养液保存于4摄氏度。首先要注意细胞培养液的颜色,富含营养的新鲜培养液由于添加了pH指示剂酚红故为透明橙色。当细胞耗尽培养液中的营养成分时,开始在培养物中积累废物和酸性物质,降低pH值。因此,许多细胞培养液含有酚红,当培养物呈酸性时会将培养液颜色由橙色变为黄色。培养液需在变黄之前更换。当酚红变为粉红色时,说明培养基pH偏碱,不利于细胞健康生长。这时可能需要改变二氧化碳浓度并更换培养液。很多贴壁细胞系可天然附着于无涂层的塑料上。因此,塑料细胞培养板如培养皿或六孔板经常用于传代细胞。塑料的细胞培养瓶也经常用到,如T25的细胞培养瓶,常用于扩增培养数目少的细胞或者开始培养生长缓慢的细胞系。T75细胞培养瓶常用在培养扩增速度较快的细胞系或用于生长超过T25培养瓶容量的大量细胞。在转移贴壁细胞时,要先剪切掉细胞上与和塑料结合的蛋白。因此,消化酶胰酶常用于消化细胞。控制胰酶消化的时间很重要,因为如果处理时间过长会损坏细胞表面的蛋白。细胞培养液能中和胰酶。所以在胰酶消化前常用磷酸缓冲液或PBS洗涤细胞。EDTA,一种钙螯合剂有时候也用于提GAO胰酶的蛋白水解功能。为扩增细胞克隆,将新鲜传代的细胞培养于细胞培养箱中,选择适合该细胞生长条件,通常为温度37度,二氧化碳5%和湿度95%。
细胞生长特性:贴壁
CCD841CoTr细胞类似产品::A-72细胞、MFM223细胞、U-343细胞
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CCD-18Co正常人结肠成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)
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VeroC1008细胞类似产品::Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
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B-95-8细胞类似产品::L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞
FDCP1细胞类似产品::RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
GEO细胞类似产品::NCI-H1373细胞、BSC-40细胞、OCI-LY-7细胞
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CAL-39细胞类似产品::B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
Sol8细胞类似产品::RAW2647细胞、Oregon J-111细胞、U-118MG细胞
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CCRF-CEM/S细胞类似产品::Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
KYSE 50细胞类似产品::HeLa S3细胞、HM1900细胞、Huh7.5.1细胞
CD-18细胞类似产品::B16 melanoma F10细胞、NCIH1573细胞、RAEC细胞
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SKNF1细胞类似产品::HAC-84细胞、SNU638细胞、AtT-20细胞
Pt K2 (NBL-5)细胞类似产品::NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞
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U-373 MG细胞类似产品::L-132细胞、Huh7.5.1细胞、GS9L细胞
CV-1细胞类似产品::CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞
NCIH2126细胞类似产品::GM05862细胞、H1954细胞、HS-766T细胞
X63-AG 8.653细胞类似产品::LAN-5细胞、OVCAR433细胞、H-157细胞
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BV173细胞类似产品::RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞
HBZY1细胞类似产品::VeroE6细胞、Mac-1细胞、LS 174T细胞
UM-UC-14细胞类似产品::CF-1 MEF细胞、GL261细胞、ZYM-DIEC02细胞
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