"NRK-49F Cell|大鼠正常肾成纤维细胞
细胞背景资料:肾;成纤维细胞;自发永生
细胞形态:成纤维细胞样
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良HAO(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞生长:贴壁
NS1细胞类似产品::H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞
T-ALL-1细胞类似产品::NCI-H716细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、VP229细胞
B16-F0细胞类似产品::Hs737T细胞、RK 13细胞、H1155细胞
CL MC/9细胞类似产品::HFL 1细胞、NK92细胞、UCLA-SO-M20细胞
NS1-Ag 4/1细胞类似产品::Karpas299细胞、786-O细胞、COLO-1细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NRK-49F Cell|大鼠正常肾成纤维细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,ZuiHAO经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
CHL-1细胞类似产品::NCI-128细胞、HEK/EBNA细胞、MGH-U1细胞
HTori 3细胞类似产品::P3.653细胞、MEC1细胞、PGLH7细胞
HARA-B细胞类似产品::HUCCT1细胞、MARC145细胞、DR2R1610细胞
LS 180细胞类似产品::HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞培养中的污染分为两类,化学污染和生物污染;生物污染包括比较容易发现的细菌、霉菌和酵母的污染,和较难发现的病毒、支原体和其他细胞的污染。细菌、霉菌和酵母到处存在,它们能在合适的环境中非常快速的生长。这些污染比较容易观察到,它们往往会使其污染的培养液产生可见的变化,或者通过显微镜观察就可以看见。由于病毒有种属异性,所以病毒污染的概率比较小。但是病毒污染难于发现,因为病毒颗粒别微小,一般的实验室都没能力检查细胞培养中污染的病毒。由于病毒一般潜伏在细胞内,对整个细胞培养不是致死的,所以它可能会使研究人员长期得到受病毒影响的细胞的实验结果。1956年Robinson及其同事首次发现细胞培养中的支原体污染。90年代初的一个调查发现,在美国培养的细胞中,至少有15%被支原体污染。由于支原体没有细胞壁,在细胞培养液中几乎是透明的,同时对常用于细胞培养中的抗生素不敏感,不引起pH变化,不使培养液浑浊,所以支原体污染不容易被发现,但是其存在会影响实验的结果。培养多种细胞时操作不当,会导致细胞的交叉污染。由于不同细胞的生产速率不同,污染的生长速率快的细胞终会完全取代被污染的细胞。
FRTL-5细胞类似产品::Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞
ketr 3细胞类似产品::HTSMC细胞、Granta-519细胞、OVCAR 4细胞
Y79细胞类似产品::CHL-1细胞、MAVER细胞、NCI-H211细胞
TE-14细胞类似产品::A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞
TCCPAN2细胞类似产品::HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞
H1882细胞类似产品::HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞
Reuber-H-35 hepatoma细胞类似产品::HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞
RA 1细胞类似产品::NCTC 1469细胞、A549 ATCC细胞、A-704细胞
HEK-293 c18细胞类似产品::brain-derived Endothelial cells.3细胞、Caki2细胞、GES-1细胞
U-2OS细胞类似产品::RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞
NRK-49F Cell|大鼠正常肾成纤维细胞
RPTEC TERT1细胞类似产品::786O细胞、H2591细胞、CF PAC-1细胞
H250细胞类似产品::VM-CUB1细胞、RERF-LC-MS细胞、NU-GC-2细胞
MO59J细胞类似产品::PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞
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Kuramochi细胞类似产品::OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞
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HEK-293H细胞类似产品::SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
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HCT116/L细胞类似产品::PANC 1005细胞、LAC细胞、U-2-OS细胞
Tokyo Medical and Dental university 8细胞类似产品::CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞
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L细胞类似产品::PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞
Rat Basophilic Leukemia-1细胞类似产品::Sp2/O-Ag14细胞、PG-LH7细胞、CAL-27细胞
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