"HEK293S Cell|人胚肾细胞
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握HAO细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握HAO消化浓度,当消化液浓度过GAO时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长:贴壁
IEC18细胞类似产品::MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
HEK-293A细胞类似产品::ECV-304细胞、HPDEC细胞、TK-1细胞
MIHA细胞类似产品::HCS-2/8细胞、AML-EOL-1细胞、NCIH1693细胞
SF-539 BT细胞类似产品::SCL1细胞、IMCD3细胞、HEI-193细胞
MDCC-MSB1细胞类似产品::RS4:11细胞、HCC44细胞、SGC7901/DDP细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HEK293S Cell|人胚肾细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到Zui低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
TE4细胞类似产品::RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞
Hs-688A-T细胞类似产品::LNCaP.FGC细胞、ANA1细胞、HTR-8/SV-neo细胞
J774.A1细胞类似产品::DMS114细胞、UMR 106细胞、RGC-6细胞
PTK 1细胞类似产品::Medical Research Council cell strain-9细胞、SKRC-42细胞、SHI-1细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞系永生化原理介绍:多数正常细胞的寿命是有限的,能传20-100代,但有些细胞,尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞,可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的,在传到12代左右以后可能出现危相,多数细胞在这个阶段死亡了,但少数细胞存活下来,并拥有了更GAO的生长率,成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程,包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作,病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原,可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长,同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性,从而使基因组的不稳定性增加,也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染,足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有:EBV用于淋巴母细胞样细胞;SV40 LT用于黏附细胞,如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
HT55细胞类似产品::SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
WPMY-1细胞类似产品::8226细胞、K7M2-WT细胞、VM Cub 1细胞
MILE SVEN1细胞类似产品::3T3-A31细胞、HuH7细胞、IFRS1细胞
OVCA8细胞类似产品::GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞
CD 18细胞类似产品::KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
MDA-MB 231细胞类似产品::HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
OVCAR10细胞类似产品::U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞
ARPE-19细胞类似产品::CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
GM07404A细胞类似产品::SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞
Neuro2a细胞类似产品::DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞
HEK293S Cell|人胚肾细胞
DBTRG-05MG细胞类似产品::EBTr细胞、HB611细胞、NCI-SNU-216细胞
RPMI 1788细胞类似产品::Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞
NTERA-2/D1细胞类似产品::RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞
MDA-MB 468细胞类似产品::U373细胞、SKMEL5细胞、ARPE19细胞
NRK 49F细胞类似产品::MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
624-mel细胞类似产品::HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、aNK细胞、NUGC-2细胞
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GA-10-Clone-4细胞类似产品::MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞
32D:cl3细胞类似产品::Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞
B-95-8细胞类似产品::L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞
624细胞类似产品::MCMEC细胞、D10.G4.1细胞、CMT 64细胞
AN3 CA细胞类似产品::BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞
Hs940.T细胞类似产品::293 HEK细胞、UMNSAH-DF 1细胞、IGROV细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞类似产品::GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
HS-294T细胞类似产品::HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
U2932细胞类似产品::RL95细胞、Rat-1细胞、HUT-226细胞
MA-104细胞类似产品::Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞
PA-1细胞类似产品::Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
MIHA细胞类似产品::HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞
RD 2细胞类似产品::SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞
LS 180细胞类似产品::HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
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BV2细胞类似产品::KYSE 520细胞、HCC-2108细胞、SKG3A细胞
MDCK (NBL-2)细胞类似产品::KMS-26细胞、As-PC1细胞、NCI-H69C细胞
BC-025细胞类似产品::Ramos G6.C10细胞、Human Microglia Clone 3细胞、NCI-H748细胞
NOR10细胞类似产品::NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞
NCI-H810细胞类似产品::ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞
EB-1细胞类似产品::SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞
U-373MG ATCC细胞类似产品::IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞
HEK293S Cell|人胚肾细胞
UACC 812细胞类似产品::RL-952细胞、VMM5细胞、Tu212细胞
Tn-5B1-4细胞类似产品::OSC-19细胞、MNNG-HOS细胞、HL-60 Clone 15细胞
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HSF细胞类似产品::C3H10T1/2 clone8细胞、MGECs细胞、NCIH2106细胞
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CHO K1细胞类似产品::CAL 78细胞、NCIH1623细胞、NCI-H82细胞
STTG1细胞类似产品::QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞
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M14细胞类似产品::SK MEL-28细胞、T1-73细胞、Douglas Foster-1细胞
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