"4T1.2 Cell|小鼠高转移性乳腺癌细胞
细胞背景资料:乳腺癌;雌性;BALB/cfC3H
细胞形态:上皮细胞样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞Zui大的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞生长:贴壁
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞类似产品::451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞
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alpha TC1-6细胞类似产品::Namalva细胞、AtT 20细胞、HPAC细胞
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Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞类似产品::TMD8细胞、SK-MEL5细胞、RERF-LCMS细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
4T1.2 Cell|小鼠高转移性乳腺癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到Zui低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
L-363细胞类似产品::H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
MDBK (NBL-1)细胞类似产品::H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞系永生化原理介绍:多数正常细胞的寿命是有限的,能传20-100代,但有些细胞,尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞,可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的,在传到12代左右以后可能出现危相,多数细胞在这个阶段死亡了,但少数细胞存活下来,并拥有了更GAO的生长率,成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程,包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作,病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原,可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长,同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性,从而使基因组的不稳定性增加,也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染,足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有:EBV用于淋巴母细胞样细胞;SV40 LT用于黏附细胞,如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
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4T1.2 Cell|小鼠高转移性乳腺癌细胞
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NCI-1155细胞类似产品::GM05372细胞、MCF7-GFP细胞、102PT细胞
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