"SUM190PT Cell|人乳腺癌细胞
细胞背景资料:乳腺癌;女性
细胞形态:上皮细胞样
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握HAO细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握HAO消化浓度,当消化液浓度过GAO时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长:贴壁
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细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SUM190PT Cell|人乳腺癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到Zui低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞培养试剂也依据不同细胞类型来选择:细胞培养试剂的种类很多并且不同试剂与不同细胞能产生的反应效果也不一样。因此选择试剂时要有针对性的根据细胞源进行匹配,才能起到良HAO的试验效果并能保障顺利完成实验。选择了相互匹配性HAO的细胞培养试剂不但有利于科研人员的研发分析,还可以提GAO培养的效率并保障达到培养的成功率。总而言之,对于选择细胞培养试剂来说需要根据实验的要求来进行合理的挑选匹配,只有采用了匹配度效果理想的试剂才能保障能顺利的通过实验,并避免对各种试剂材料及时间造成浪费。而且还要选择口碑HAO的细胞培养试剂才能保障材料的YOU质性,并能达到成功配置试剂的目的有效完成不同细胞培养计划。
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Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞类似产品::NCI-H-69细胞、WI38细胞、H-292细胞
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