NCI-H128 Cell|人小细胞肺癌细胞

"NCI-H128 Cell|人小细胞肺癌细胞

细胞背景资料：小细胞肺癌；胸腔积液转移；男性

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

EA hy 926细胞类似产品：：GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞

MCF.7细胞类似产品：：SKNEP1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、DH-82细胞

PK(15)细胞类似产品：：SW403细胞、TPC1细胞、Colo699细胞

SKNEP1细胞类似产品：：PG-LH7细胞、MEC1细胞、MOLT-3细胞

NS-1细胞类似产品：：LNCaP-ATCC细胞、SUM149PT细胞、Hs-578T细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

NCI-H128 Cell|人小细胞肺癌细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

JM-Jurkat细胞类似产品：：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞

EFO27细胞类似产品：：NCIH2171细胞、H1417细胞、Balb/c 3T3细胞

Keio University-19-19细胞类似产品：：SF539细胞、RPMI no 8226细胞、IHH-4细胞

U-266细胞类似产品：：EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

细胞系永生化原理介绍：多数正常细胞的寿命是有限的，能传20-100代，但有些细胞，尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞，可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的，在传到12代左右以后可能出现危相，多数细胞在这个阶段死亡了，但少数细胞存活下来，并拥有了更GAO的生长率，成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程，包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作，病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原，可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长，同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性，从而使基因组的不稳定性增加，也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染，足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有：EBV用于淋巴母细胞样细胞；SV40 LT用于黏附细胞，如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。

Caco-2/BBe 1细胞类似产品：：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞

CL 1-5细胞类似产品：：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞

RWPE-1细胞类似产品：：NCI-H2073细胞、EFM192A细胞、TE3细胞

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U266 Bl细胞类似产品：：H1651细胞、TM4细胞、SU.86.86细胞

NCI-H128 Cell|人小细胞肺癌细胞

639V细胞类似产品：：Hs695T细胞、OPM2细胞、SUDHL-4细胞

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3D4/21细胞类似产品：：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞

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HBdSMC细胞类似产品：：SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞

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NCI-H128 Cell|人小细胞肺癌细胞

T.T细胞类似产品：：SNU5细胞、H1838细胞、KNS81细胞

Tu-686细胞类似产品：：HEK-AD 293细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、ROS 17/2.8细胞

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Bowes melanoma cells细胞类似产品：：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞

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QGY7701细胞类似产品：：U343细胞、CX1细胞、AM细胞

MRCV细胞类似产品：：NCI-H524细胞、BEP2D细胞、D-283细胞

TE-9细胞类似产品：：DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞

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